L’assemblaggio di una striscia di test a flusso laterale può variare da completamente automatizzato a completamente manuale. La forza trainante per la scelta della produzione è il tempo e il costo. Nella produzione su larga scala (ad esempio >1 milione all’anno) l’uso dell’automazione può ridurre significativamente il costo complessivo per striscia. Un esempio di questo tipo di automazione è il BioDot Reel-to-Reel Dispensing Systems.

Laminazione

La laminazione è il termine dato all’assemblaggio di tutti i componenti della striscia a flusso laterale in un unico elemento. Questo assemblaggio inizia con la carta di supporto. Le schede di supporto sono tipicamente fatte di vinile con un adesivo acrilico su un lato che è coperto da una fodera di precisione. Ogni componente che viene assemblato sulla scheda di supporto avrà tipicamente il suo liner di rilascio dedicato. Di seguito è riportato un esempio del liner di rilascio per la membrana di nitrocellulosa, che si trova tipicamente al centro della scheda di supporto, che viene tirato indietro prima di far aderire la membrana alla scheda di supporto.

L’ordine in cui una scheda di supporto viene laminata con i componenti della striscia a flusso laterale è molto importante. In genere, la membrana di nitrocellulosa viene laminata per prima sul supporto, poiché deve trovarsi sotto il tampone dello stoppino e il tampone del campione affinché il flusso capillare funzioni come desiderato. Una volta che la membrana di nitrocellulosa è stato laminato sulla scheda di supporto, è possibile rimuovere il liner adesivo per il pad coniugato o pad assorbente, e laminare entrambi rispettivamente. Ognuno di questi componenti avrà bisogno di qualche sovrapposizione con la membrana di nitrocellulosa. Una volta che questi tre componenti sono stati laminati, viene applicato il tampone campione. Il tampone del campione deve sovrapporsi al tampone del coniugato in modo che il campione passi al tampone del coniugato, dopodiché il coniugato verrà rilasciato e scorrerà sulla membrana insieme al campione. Anche se la laminazione può essere fatta a mano, è comune usare una macchina per la laminazione come la Kinematic Matrix 2210.

Con l’uso del vuoto per tenere il materiale in posizione, e una chiave di laminazione per assicurare che i materiali siano laminati nella posizione corretta, le schede di supporto sono assemblate con alta riproducibilità. Una volta che la scheda di supporto è stata completamente assemblata, viene chiamata “master card”.

Taglio

Dopo che tutti i componenti della striscia a flusso laterale sono stati laminati sulla scheda di supporto, la master card è pronta per essere tagliata in strisce. Una ghigliottina automatica può essere usata per tagliare accuratamente le strisce con un alto grado di riproducibilità.

Dopo che tutti i componenti della striscia a flusso laterale sono stati laminati sulla scheda di supporto, la scheda master è ora pronta per essere tagliata in strisce. Una ghigliottina automatica può essere utilizzata per tagliare accuratamente le strisce con un alto grado di riproducibilità.

I due problemi più comuni durante il taglio sono la variabilità della larghezza della striscia e i bordi sfilacciati. La larghezza della striscia può essere verificata con calibri di precisione, e dovrebbe essere fatto in modo coerente, sia quando si inizia a tagliare una mastercard che durante il taglio per garantire la coerenza. I bordi sfrangiati sono tipicamente un sottoprodotto della lama della ghigliottina che si opacizza nel tempo, e influisce negativamente sulle condizioni di funzionamento. È importante pulire e affilare la lama della ghigliottina regolarmente. Le larghezze delle strisce possono variare a seconda dei requisiti specifici del saggio. Le strisce più sottili sono più convenienti (numero maggiore di strisce per scheda) ma possono essere meno accurate a causa degli effetti dei bordi. I saggi quantitativi sono più comunemente tagliati a larghezze di 5-6 mm.

Cassetta

La cassetta che ospita la striscia di test può essere uno dei componenti più critici per ottenere un test di flusso successivo riproducibile e affidabile, ed è particolarmente importante per i test quantitativi. La cassetta fornisce il controllo del flusso applicando la pressione in punti appropriati sulla striscia per garantire che tutto il fluido passa attraverso il gruppo striscia alla stessa velocità di flusso. Assicura inoltre che il fluido scorra attraverso i materiali della striscia piuttosto che passare solo sopra la parte superiore della striscia o scorrere lungo i bordi. In genere, le cassette sono progettate dopo che tutti i materiali sono stati selezionati e ottimizzati, ed è importante personalizzare la cassetta alle lunghezze, larghezze e spessori di ogni componente. I punti di pressione alle giunzioni dei materiali controllano la velocità di flusso del fluido campione, consentendo tempi di incubazione più lunghi o più brevi del coniugato con l’analita campione. Per la produzione su larga scala, una cassetta personalizzata progettata da una società di progettazione industriale esperto è necessario, preferibilmente una società che ha già esperienza cassetta flusso laterale. Per i test iniziali, le cassette generiche esistenti possono essere sufficienti. L’assemblaggio automatizzato della cassetta è possibile, ma tradizionalmente l’assemblaggio viene eseguito manualmente con l’aiuto di un rullo di assemblaggio della cassetta. Il rullo di assemblaggio utilizza un alimentatore a nastro per spostare le cassette attraverso un rullo che applicherà una pressione costante attraverso l’alloggiamento superiore per chiudere la cassetta. È sempre meglio controllare visivamente tutti i prodotti finali per garantire le strisce sono stati assemblati correttamente (ad esempio la striscia è stata posta nella cassetta con l’orientamento corretto), e la nitrocellulosa non ha macchie o graffi che possono essersi verificati durante il processo di assemblaggio.

Per alcuni saggi, una lettura quantitativa non è richiesto e un formato dipstick può essere sufficiente per l’esecuzione della striscia. In questo formato, non c’è alcun tampone per il campione o il coniugato e la striscia viene posta in posizione verticale direttamente nel campione liquido. Le strisce in questo formato non sono collocate all’interno di una cassetta di plastica, ma viene utilizzato un nastro di copertura per fornire il controllo del flusso e per tenere insieme tutti i componenti della striscia. Questo è descritto ulteriormente nel prossimo modulo.