Montering av testremsor för lateralt flöde

Monteringen av en testremsa för lateralt flöde kan sträcka sig från helt automatiserad till helt manuell. Drivkraften för tillverkningsvalet är tid och kostnad. Vid storskalig tillverkning (t.ex. >1 miljon per år) kan användningen av automatisering avsevärt sänka den totala kostnaden per remsa. Ett exempel på denna typ av automatisering är BioDot Reel-to-Reel Dispensing Systems.

Biodot Lateral Flow Automated Manufacturing

Laminering

Laminering är benämningen på sammansättningen av alla komponenterna i lateralflödesremsorna till en enda produkt. Denna sammansättning börjar med baksidan av kortet. Baksidekorten är vanligtvis tillverkade av vinyl med ett akryllim på ena sidan som är täckt med en precisionsskuren avdragbar skyddsfolie. Varje komponent som monteras på stödkortet kommer vanligtvis att ha sin egen särskilda skyddsfolie. Nedan visas ett exempel på hur man drar tillbaka den avdragbara skyddsfilmen för nitrocellulosamembranet, som vanligtvis finns i mitten av stödkortet, innan man fäster membranet på stödkortet.

Laminering av stödkortet för nitrocellulosaassay

Den ordning i vilken stödkortet lamineras med komponenterna i sidoflödesremsan är mycket viktig. Vanligtvis lamineras nitrocellulosamembranet på underlaget först, eftersom det måste ligga under både våtkudden och provkudden för att det kapillära flödet ska fungera som önskat. När nitrocellulosamembranet har laminerats på underlaget kan du ta bort den självhäftande hinnan för antingen konjugatkudden eller den absorberande kudden och laminera båda. Var och en av dessa komponenter kommer att behöva en viss överlappning med nitrocellulosamembranet. När dessa tre komponenter har laminerats appliceras provtagningsdynan. Provplattan måste överlappa den konjugerade plattan för att provet skall övergå till den konjugerade plattan, varefter konjugatet frigörs och flyter på membranet tillsammans med provet. Även om lamineringen kan göras för hand är det vanligt att använda en lamineringsmaskin som Kinematic Matrix 2210.

Kinematic Matrix 2210 Laminator

Med hjälp av vakuum för att hålla materialet på plats och en lamineringsnyckel för att se till att materialen lamineras i exakt rätt position, monteras backingkorten med hög reproducerbarhet. När backkortet har monterats helt och hållet kallas det nu för ”masterkort”.

Skärning

När alla komponenter för laterala flödesremsor har laminerats på backkortet är masterkortet nu redo att skäras till remsor. En automatiserad giljotin kan användas för att exakt skära remsor med hög grad av reproducerbarhet.

Biodot giljotin CM5000

När alla komponenter för remsor för lateralt flöde har laminerats på underlagskortet är huvudkortet nu redo att skäras till remsor. En automatiserad giljotin kan användas för att exakt skära remsor med en hög grad av reproducerbarhet.

De två vanligaste problemen vid skärning är variationer i remsans bredd och fransiga kanter. Bandbredden kan verifieras med precisionsmätare, och det bör göras konsekvent, både när man börjar skära ett mastercard och under hela skärningen för att säkerställa enhetlighet. Utfransade kanter är vanligtvis en biprodukt av att giljotinbladet blir slöare med tiden och påverkar körförhållandena negativt. Det är viktigt att rengöra och vässa giljotinbladet regelbundet. Bandbredden kan variera beroende på de specifika kraven för analysen. Tunnare remsor är mer kostnadseffektiva (större antal remsor per kort) men kan vara mindre exakta på grund av kanteffekter. Kvantitativa analyser skärs oftast till 5-6 mm breda remsor.

Kassett

Kassetten som rymmer testremsan kan vara en av de mest kritiska komponenterna för att uppnå en reproducerbar och tillförlitlig later flow-analys, och är särskilt viktig för kvantitativa tester. Kassetten ger flödeskontroll genom att applicera tryck på lämpliga punkter på remsan för att säkerställa att all vätska passerar genom remsanordningen med samma flödeshastighet. Den säkerställer också att vätskan flödar genom testremsans material i stället för att bara passera över remsans ovansida eller rinna längs kanterna. Typiskt sett utformas kassetter efter att alla material har valts ut och optimerats, och det är viktigt att anpassa kassetten till varje komponents längd, bredd och tjocklek. Tryckpunkter vid materialförbindelserna styr provvätskans flödeshastighet, vilket möjliggör längre eller kortare inkubationstider för konjugatet med analyten i provet. För storskalig produktion krävs en skräddarsydd kassett från ett erfaret industriellt designföretag, helst ett företag som redan har sakkunskap om laterala flödeskassetter. För inledande testning kan befintliga generiska kassetter vara tillräckliga. Automatiserad kassettmontering är möjlig, men traditionellt sker monteringen manuellt med hjälp av en kassettmonteringsrulle. I monteringsrullen används en bandmatare för att flytta kassetter genom en rulle som ger ett jämnt tryck över det övre höljet för att stänga kassetten. Det är alltid bäst att visuellt kontrollera alla slutprodukter för att säkerställa att remsorna har monterats korrekt (t.ex. att remsan placerades i rätt riktning i kassetten) och att nitrocellulosan inte har några fläckar eller repor som kan ha uppstått under monteringsprocessen.

För vissa analyser krävs ingen kvantitativ avläsning och det kan räcka med ett mätstavsformat för att köra remsan. I detta format finns det inget prov eller konjugatkudde och remsan placeras upprätt direkt i det flytande provet. Remsor i detta format placeras inte i en plastkassett, utan istället används täcktejp för att ge flödeskontroll och för att hålla ihop alla delar av remsan. Detta beskrivs närmare i nästa modul.