A montagem de uma tira de teste de fluxo lateral pode variar de totalmente automatizada a completamente manual. A força motriz para a escolha da fabricação é o tempo e o custo. Na fabricação em larga escala (por exemplo >1 milhão por ano) o uso da automação pode reduzir significativamente o custo total por tira. Um exemplo deste tipo de automação é o BioDot Reel-to-Reel Dispensing Systems.

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Lamination

Lamination é o termo dado à montagem de todos os componentes da tira de fluxo lateral em um único item. Esta montagem começa com o cartão de suporte. Os cartões de suporte são normalmente feitos de vinil com um adesivo acrílico em um lado que é coberto com um forro de liberação de corte de precisão. Cada componente a ser montado no cartão de suporte terá tipicamente o seu próprio forro de desengate dedicado. Abaixo está um exemplo do revestimento de liberação para a membrana nitrocelulósica, que está tipicamente no centro do cartão de suporte, sendo puxado para trás antes de aderir a membrana ao cartão de suporte.

A ordem em que um cartão de suporte é laminado com os componentes da faixa de fluxo lateral é muito importante. Normalmente, a membrana nitrocelulósica será laminada primeiro sobre o suporte, pois terá de estar debaixo do tapete de pavio e da almofada de amostra para que o fluxo capilar funcione como desejado. Uma vez que a membrana de nitrocelulose tenha sido laminada sobre o cartão de suporte, você pode remover o revestimento adesivo para a almofada conjugada ou absorvente, e laminar ambos, respectivamente. Cada um destes componentes necessitará de alguma sobreposição com a membrana nitrocelulósica. Uma vez que estes três componentes tenham sido laminados, a almofada de amostra é aplicada. O bloco de amostra precisa se sobrepor ao bloco conjugado para que a amostra passe para o bloco conjugado, após o que o conjugado se soltará e fluirá para a membrana junto com a amostra. Embora a laminação possa ser feita manualmente, é comum usar uma máquina de laminação como a Kinematic Matrix 2210.

Com o uso de aspiradores para manter o material no lugar, e uma chave de laminação para garantir que os materiais estejam sendo laminados precisamente na posição correta, os cartões de suporte são montados com alta reprodutibilidade. Uma vez que o cartão de suporte tenha sido totalmente montado, é agora referido como “cartão mestre”.

Corte

Após todos os componentes laterais da banda de fluxo terem sido laminados no cartão de suporte, o cartão mestre está agora pronto para ser cortado em tiras. Uma guilhotina automática pode ser usada para cortar com precisão tiras com alto grau de reprodutibilidade.

Depois de todos os componentes da faixa de fluxo lateral terem sido laminados no cartão de suporte, o cartão mestre está agora pronto para ser cortado em tiras. Uma guilhotina automatizada pode ser usada para cortar com precisão tiras com alto grau de reprodutibilidade.

Os dois problemas mais comuns durante o corte são a variabilidade da largura da tira e as bordas desfiadas. A largura das tiras pode ser verificada com paquímetros de precisão, e deve ser feita de forma consistente, tanto no início do corte de um mastercard como durante todo o corte para garantir a consistência. As bordas desgastadas são tipicamente um subproduto da lâmina de guilhotina que se entorpece ao longo do tempo, e que terá um impacto negativo nas condições de funcionamento. É importante limpar e afiar a lâmina da guilhotina regularmente. A largura das tiras pode variar de acordo com os requisitos específicos do ensaio. As tiras mais finas são mais rentáveis (maior número de tiras por cartão), mas podem ser menos precisas devido aos efeitos de borda. Os ensaios quantitativos são mais frequentemente cortados com larguras de 5-6 mm.

Cassete

O cassete que aloja a tira de teste pode ser um dos componentes mais críticos para conseguir um ensaio de fluxo posterior reproduzível e confiável, e é especialmente importante para testes quantitativos. O cassete proporciona o controle do fluxo aplicando pressão em pontos apropriados na tira para garantir que todo o fluido passe pelo conjunto da tira com o mesmo fluxo. Também assegura que o fluido flua através dos materiais da tira de teste em vez de passar apenas sobre a parte superior da tira ou fluir ao longo das bordas. Normalmente, os cassetes são desenhados depois de todos os materiais terem sido selecionados e otimizados, e é importante personalizar o cassete para os comprimentos, larguras e espessuras de cada componente. Os pontos de pressão nas junções dos materiais controlam o fluxo do fluido da amostra, permitindo tempos de incubação mais longos ou mais curtos do conjugado com o analito da amostra. Para a produção em larga escala, é necessário um cassete projetado sob medida de uma empresa de projeto industrial experiente, de preferência uma empresa que já tenha experiência em cassete de fluxo lateral. Para os testes iniciais, cassetes genéricos existentes podem ser suficientes. A montagem automatizada de cassetes é possível, mas tradicionalmente a montagem é feita manualmente com a ajuda de um rolo de montagem de cassetes. O rolo de montagem utiliza um alimentador de correia para mover os cassetes através de um rolo que aplicará uma pressão consistente através da caixa superior para fechar o cassete. É sempre melhor verificar visualmente todos os produtos finais para garantir que as tiras foram montadas corretamente (por exemplo, a tira foi colocada no cassete na orientação correta), e a nitrocelulose não tem manchas ou arranhões que possam ter ocorrido durante o processo de montagem.

Para alguns ensaios, uma leitura quantitativa não é necessária e um formato de vareta pode ser suficiente para executar a tira. Neste formato, não há nenhuma amostra ou almofada conjugada, e a tira é colocada na vertical diretamente na amostra líquida. As tiras neste formato não são colocadas dentro de um cassete plástico e, em vez disso, a fita de cobertura é utilizada para fornecer controle de fluxo e para manter todos os componentes da tira juntos. Isto é descrito mais adiante no próximo módulo.