L’assemblage d’une bandelette de test de flux latéral peut aller d’une fabrication entièrement automatisée à une fabrication entièrement manuelle. La force motrice pour le choix de fabrication est le temps et le coût. Lors d’une fabrication à grande échelle (par exemple >1 million par an), l’utilisation de l’automatisation peut réduire considérablement le coût global par bandelette. Un exemple de ce type d’automatisation est le système de distribution en bobine à bobine BioDot.

Lamination

La lamination est le terme donné à l’assemblage de tous les composants de la bande à flux latéral en un seul article. Cet assemblage commence par la carte de support. Les cartes de support sont généralement faites de vinyle avec un adhésif acrylique sur un côté qui est recouvert d’un revêtement antiadhésif découpé avec précision. Chaque composant assemblé sur la carte de support possède généralement sa propre feuille de protection. Ci-dessous est un exemple de la doublure antiadhésive pour la membrane de nitrocellulose, qui est typiquement au centre de la carte de support, étant tirée vers l’arrière avant de faire adhérer la membrane sur la carte de support.

L’ordre dans lequel une carte de support est stratifiée avec les composants de la bande d’écoulement latéral est très important. Typiquement, la membrane de nitrocellulose sera laminée sur le support en premier, car elle devra être sous le tampon à mèche et le tampon d’échantillon pour que le flux capillaire fonctionne comme souhaité. Une fois que la membrane de nitrocellulose a été laminée sur la carte de support, vous pouvez retirer la pellicule adhésive du tampon conjugué ou du tampon absorbant, et les laminer respectivement. Chacun de ces composants devra chevaucher la membrane de nitrocellulose. Une fois que ces trois composants ont été laminés, le tampon d’échantillonnage est appliqué. Le tampon d’échantillonnage doit chevaucher le tampon de conjugaison pour que l’échantillon passe sur le tampon de conjugaison, après quoi le conjugué sera libéré et s’écoulera sur la membrane avec l’échantillon. Bien que la stratification puisse être effectuée à la main, il est courant d’utiliser une machine de stratification comme la Kinematic Matrix 2210.

Avec l’utilisation d’aspirateurs pour maintenir le matériau en place, et d’une clé de stratification pour s’assurer que les matériaux sont stratifiés à la position précisément correcte, les cartes de support sont assemblées avec une grande reproductibilité. Une fois que la carte de support a été entièrement assemblée, elle est maintenant appelée « carte maîtresse ».

Découpe

Après que tous les composants de la bande d’écoulement latéral ont été laminés sur la carte de support, la carte maîtresse est maintenant prête à être découpée en bandes. Une guillotine automatisée peut être utilisée pour couper avec précision les bandes avec un haut degré de reproductibilité.

Après que tous les composants de la bande de flux latéral ont été laminés sur la carte de support, la carte maîtresse est maintenant prête à être coupée en bandes. Une guillotine automatisée peut être utilisée pour couper avec précision les bandes avec un haut degré de reproductibilité.

Les deux problèmes les plus courants pendant la coupe sont la variabilité de la largeur de la bande et les bords effilochés. La largeur de la bande peut être vérifiée à l’aide d’un pied à coulisse de précision, et devrait l’être systématiquement, à la fois au début de la découpe d’une carte maîtresse et tout au long de la découpe pour assurer la cohérence. Les bords effilochés sont généralement le résultat de l’émoussement de la lame de la guillotine au fil du temps et ont un impact négatif sur les conditions de fonctionnement. Il est important de nettoyer et d’affûter la lame de la guillotine régulièrement. La largeur des bandes peut varier en fonction des exigences spécifiques de l’essai. Les bandes plus fines sont plus rentables (plus grand nombre de bandes par carte) mais peuvent être moins précises en raison des effets de bord. Les dosages quantitatifs sont le plus souvent coupés à des largeurs de 5-6 mm.

Cassette

La cassette qui abrite la bandelette de test peut être l’un des composants les plus critiques pour obtenir un test de flux ultérieur reproductible et fiable, et est particulièrement importante pour les tests quantitatifs. La cassette permet de contrôler le débit en appliquant une pression aux points appropriés de la bandelette pour s’assurer que tout le fluide traverse l’ensemble de la bandelette au même débit. Elle garantit également que le fluide s’écoule à travers les matériaux de la bandelette plutôt que de passer juste au-dessus de la bandelette ou de s’écouler le long des bords. Généralement, les cassettes sont conçues après que tous les matériaux ont été sélectionnés et optimisés, et il est important d’adapter la cassette aux longueurs, largeurs et épaisseurs de chaque composant. Les points de pression aux jonctions des matériaux contrôlent le débit du fluide de l’échantillon, ce qui permet d’allonger ou de raccourcir le temps d’incubation du conjugué avec l’échantillon d’analyte. Pour une production à grande échelle, une cassette conçue sur mesure par une société de conception industrielle expérimentée est nécessaire, de préférence une société qui possède déjà une expertise en matière de cassettes à flux latéral. Pour les essais initiaux, les cassettes génériques existantes peuvent être suffisantes. L’assemblage automatisé des cassettes est possible, mais traditionnellement, l’assemblage est effectué manuellement à l’aide d’un rouleau d’assemblage de cassettes. Le rouleau d’assemblage utilise une courroie d’alimentation pour déplacer les cassettes à travers un rouleau qui appliquera une pression constante sur le boîtier supérieur pour fermer la cassette. Il est toujours préférable de vérifier visuellement tous les produits finaux pour s’assurer que les bandes ont été assemblées correctement (par exemple, la bande a été placée dans la cassette dans la bonne orientation), et que la nitrocellulose ne présente pas de taches ou de rayures qui auraient pu se produire pendant le processus d’assemblage.

Pour certains essais, une lecture quantitative n’est pas nécessaire et un format de dipstick peut être suffisant pour exécuter la bande. Dans ce format, il n’y a pas de tampon d’échantillon ou de conjugué, et la bandelette est placée à la verticale directement dans l’échantillon liquide. Dans ce format, la bande n’est pas placée dans une cassette en plastique, mais un ruban adhésif est utilisé pour contrôler le flux et maintenir tous les composants de la bande ensemble. Ceci est décrit plus en détail dans le module suivant.