De assemblage van een lateral flow test strip kan variëren van volledig geautomatiseerd tot volledig handmatig. De drijvende kracht voor de fabricage keuze is tijd en kosten. Bij grootschalige produktie (b.v. >1 miljoen per jaar) kan het gebruik van automatisering de totale kosten per strip aanzienlijk verlagen. Een voorbeeld van dit type automatisering zijn de BioDot Reel-to-Reel Dispensing Systems.

Laminering

Laminering is de term die wordt gegeven aan de assemblage van alle componenten van de lateral flow-strips tot één enkel item. Deze assemblage begint met de steunkaart. De steunkaarten worden typisch gemaakt van vinyl met een acrylkleefstof aan één kant die met een nauwkeurig gesneden versievoering wordt behandeld. Elk onderdeel dat op de steunkaart wordt geassembleerd zal typisch zijn eigen specifieke schutblad hebben. Hieronder ziet u een voorbeeld van het terugtrekken van de schutlaag voor het nitrocellulosemembraan, dat zich meestal in het midden van de steunkaart bevindt, voordat het membraan op de steunkaart wordt geplakt.

De volgorde waarin een steunkaart met de componenten van de laterale stroomstrook wordt gelamineerd, is zeer belangrijk. Normaal gesproken wordt het nitrocellulosemembraan eerst op de steunkaart gelamineerd, omdat het onder zowel het wikkelkussen als het monsterkussen moet liggen om de capillaire stroming naar wens te laten verlopen. Zodra het nitrocellulosemembraan op de steunkaart is gelamineerd, kan de kleefstrook voor het conjugaatkussen of het absorberende kussen worden verwijderd en kunnen beide worden gelamineerd. Elk van deze componenten moet enigszins overlappen met het nitrocellulosemembraan. Zodra deze drie componenten gelamineerd zijn, wordt het sample-pad aangebracht. Het monsterkussen moet het conjugaatkussen overlappen zodat het monster op het conjugaatkussen kan overgaan, waarna het conjugaat vrijkomt en samen met het monster op het membraan vloeit. Hoewel het lamineren met de hand kan worden gedaan, wordt gewoonlijk een lamineermachine zoals de Kinematic Matrix 2210 gebruikt.

Met behulp van vacuüms om het materiaal op zijn plaats te houden en een lamineersleutel om ervoor te zorgen dat het materiaal op precies de juiste positie wordt gelamineerd, worden de backingkaarten met een hoge reproduceerbaarheid geassembleerd. Zodra de backing card volledig is geassembleerd, wordt deze nu aangeduid als een “master card”.

Snijden

Nadat alle componenten van de lateral flow strip op de backing card zijn gelamineerd, is de master card nu klaar om in stroken te worden gesneden. Met een geautomatiseerde guillotine kunnen de stroken nauwkeurig en met een hoge mate van reproduceerbaarheid worden gesneden.

Nadat alle componenten van de laterale stroomstrook op de steunkaart zijn gelamineerd, is de moederkaart nu klaar om in stroken te worden gesneden. Met een geautomatiseerde guillotine kunnen de stroken nauwkeurig en met een hoge mate van reproduceerbaarheid worden gesneden.

De twee meest voorkomende problemen bij het snijden zijn variaties in de strookbreedte en rafelige randen. De strookbreedte kan worden geverifieerd met een precisiekaliber, en dit moet consequent worden gedaan, zowel bij het begin van het snijden van een mastercard als tijdens het snijden om consistentie te garanderen. Gerafelde randen zijn typisch een bijproduct van het na verloop van tijd bot worden van het guillotine-mes, en zullen een negatieve invloed hebben op de werkomstandigheden. Het is belangrijk om het guillotine-mes regelmatig schoon te maken en te slijpen. De strookbreedte kan variëren naargelang de specifieke assayvereisten. Dunnere stroken zijn kosteneffectiever (groter aantal stroken per kaart), maar kunnen minder nauwkeurig zijn door randeffecten. Kwantitatieve assays worden meestal gesneden op 5-6 mm breedte.

Cassette

De cassette die de teststrook bevat, kan een van de meest kritische onderdelen zijn om tot een reproduceerbare en betrouwbare later flow assay te komen, en is vooral belangrijk voor kwantitatieve tests. De cassette zorgt voor debietcontrole door op de juiste punten op de strook druk uit te oefenen om ervoor te zorgen dat alle vloeistof met dezelfde stroomsnelheid door de strookassemblage stroomt. De cassette zorgt er ook voor dat de vloeistof door de materialen van de teststrook stroomt in plaats van alleen over de bovenkant van de strook te gaan of langs de randen te stromen. Typisch worden cassettes ontworpen nadat alle materialen geselecteerd en geoptimaliseerd zijn, en het is belangrijk om de cassette aan te passen aan de lengtes, breedtes en diktes van elk onderdeel. Drukpunten op materiaalverbindingen controleren de stroomsnelheid van de monstervloeistof, waardoor langere of kortere incubatietijden van conjugaat met monsteranalyt mogelijk worden. Voor productie op grote schaal is een op maat ontworpen cassette van een ervaren industrieel ontwerpbedrijf noodzakelijk, bij voorkeur een bedrijf dat reeds over expertise op het gebied van laterale flowcassettes beschikt. Voor de eerste tests kunnen bestaande generische cassettes volstaan. Geautomatiseerde cassette-assemblage is mogelijk, maar traditioneel wordt de assemblage manueel uitgevoerd met behulp van een cassette-assemblagerol. De assemblagerol gebruikt een transportband om cassettes door een rol te bewegen die een constante druk uitoefent op de bovenste behuizing om de cassette te sluiten. Het is altijd het beste om alle eindproducten visueel te controleren om er zeker van te zijn dat de strips correct zijn geassembleerd (bv. de strip is in de juiste oriëntatie in de cassette geplaatst), en de nitrocellulose heeft geen vlekken of krassen die tijdens het assemblageproces kunnen zijn ontstaan.

Voor sommige assays is een kwantitatieve uitlezing niet vereist en kan een dipstick-formaat voldoende zijn voor het uitvoeren van de strip. In dit formaat is er geen sample of conjugaatkussen, en wordt de strip rechtop rechtstreeks in het vloeibare monster geplaatst. Strips in dit formaat worden niet in een plastic cassette geplaatst, maar in plaats daarvan wordt afdekband gebruikt om de stroom te regelen en om alle componenten van de strip bij elkaar te houden. Dit wordt verder beschreven in de volgende module.