Laterális áramlási tesztcsík összeszerelése

A laterális áramlási tesztcsík összeszerelése a teljesen automatizáltól a teljesen manuálisig terjedhet. A gyártási választás mozgatórugója az idő és a költség. Nagyméretű gyártásnál (pl. >1 millió darab/év) az automatizálás alkalmazása jelentősen csökkentheti a csíkonkénti összköltséget. Az ilyen típusú automatizálás egyik példája a BioDot Reel-to-Reel adagolórendszerek.

Biodot Lateral Flow automatizált gyártás

Laminálás

Laminálásnak nevezzük az összes laterális áramlási szalagkomponens egyetlen elemmé történő összeállítását. Ez az összeszerelés a hordozókártyával kezdődik. A hátlapkártyák általában vinilből készülnek, egyik oldalukon akrilragasztóval, amelyet precíziósan vágott leválasztó bélés borít. Minden egyes, a hátlapra szerelt alkatrésznek általában saját leválasztó bélése van. Az alábbiakban egy példa látható arra, hogy a nitrocellulózmembránhoz tartozó, jellemzően az alátétkártya közepén lévő leválasztó fóliát visszahúzzák, mielőtt a membránt az alátétkártyára ragasztják.

Lamináló alátétkártya nitrocellulózpróbához

Az alátétkártya és a laterális áramlási szalag összetevőinek laminálási sorrendje nagyon fontos. Általában a nitrocellulózmembránt laminálják először a hátlapra, mivel annak mind a wick pad, mind a sample pad alatt kell lennie ahhoz, hogy a kapilláris áramlás a kívánt módon működjön. Miután a nitrocellulózmembránt a hátlapra lamináltuk, eltávolíthatjuk a konjugált pad vagy az abszorbens pad ragasztóbetétjét, és mindkettőt laminálhatjuk. Mindegyik komponensnek szüksége lesz némi átfedésre a nitrocellulózmembránnal. Miután ezt a három komponenst lamináltuk, felhelyezzük a mintatömböt. A mintatamponnak át kell fednie a konjugáltamponnal, hogy a minta átmenjen a konjugáltamponra, majd a konjugátum felszabadul és a mintával együtt a membránra folyik. Bár a laminálás kézzel is elvégezhető, gyakori az olyan laminálógép használata, mint a Kinematic Matrix 2210.

Kinematic Matrix 2210 Laminator

Az anyagot a helyén tartó vákuum és a lamináló kulcs segítségével, amely biztosítja, hogy az anyagokat pontosan a megfelelő pozícióban laminálják, a hátlapok nagy reprodukálhatósággal kerülnek összeállításra. Miután a hátlapkártya teljesen összeállt, már “mesterkártyának” nevezik.

Vágás

Azt követően, hogy az összes oldalsó áramlási szalagkomponenst a hátlapkártyára laminálták, a mesterkártya már készen áll a csíkokra vágásra. A csíkok pontos, nagyfokú reprodukálhatósággal történő vágásához egy automatizált guillotine használható.

Biodot Guillotine CM5000

Miután az összes laterális áramlású csíkösszetevőt az alapkártyára laminálták, a mesterkártya már készen áll a csíkokra vágásra. Egy automatizált guillotine segítségével pontosan és nagyfokú reprodukálhatósággal vághatók a csíkok.

A vágás során a két leggyakoribb probléma a csíkszélesség változékonysága és a kirojtosodott szélek. A csíkszélesség precíziós kalibrátorral ellenőrizhető, és ezt következetesen meg kell tenni, mind a mesterkártya vágásának megkezdésekor, mind a vágás során a következetesség biztosítása érdekében. A kirojtosodott szélek általában a guillotine penge idővel történő tompulásának melléktermékei, és negatívan befolyásolják a futási feltételeket. Fontos a guillotine penge rendszeres tisztítása és élezése. A szalagszélesség a konkrét vizsgálati követelményektől függően változhat. A vékonyabb csíkok költséghatékonyabbak (nagyobb számú csík kártyánként), de az élhatások miatt kevésbé pontosak lehetnek. A mennyiségi vizsgálatokat leggyakrabban 5-6 mm szélességűre vágják.

Kazetta

A tesztcsíkot tartalmazó kazetta az egyik legkritikusabb összetevője lehet a reprodukálható és megbízható later flow assay elérésének, és különösen fontos a kvantitatív tesztek esetében. A kazetta biztosítja az áramlásszabályozást azáltal, hogy a csík megfelelő pontjain nyomást gyakorol annak biztosítására, hogy az összes folyadék azonos áramlási sebességgel haladjon át a csíkegységen. Azt is biztosítja, hogy a folyadék átfolyik a tesztcsík anyagain, és nem csak a csík tetején vagy a széleken folyik át. A kazettákat általában az összes anyag kiválasztása és optimalizálása után tervezik meg, és fontos, hogy a kazettát az egyes komponensek hosszához, szélességéhez és vastagságához igazítsák. Az anyagok kapcsolódási pontjain lévő nyomáspontok szabályozzák a mintafolyadék áramlási sebességét, lehetővé téve a konjugátum hosszabb vagy rövidebb inkubációs idejét a minta analitjével. A nagyszabású gyártáshoz egy tapasztalt ipari tervezőcégtől származó, egyedi tervezésű kazettára van szükség, lehetőleg olyan cégtől, amely már rendelkezik laterális áramlású kazettákhoz kapcsolódó szakértelemmel. A kezdeti teszteléshez elegendőek lehetnek a meglévő általános kazetták. A kazetta összeszerelése automatizálható, de hagyományosan az összeszerelést kézzel, kazetta-összeszerelő henger segítségével végzik. Az összeszerelő görgő egy szalagadagolót használ a kazetták mozgatására egy görgőn keresztül, amely egyenletes nyomást gyakorol a felső házra a kazetta lezárásához. Mindig a legjobb az összes végterméket vizuálisan ellenőrizni, hogy megbizonyosodjunk arról, hogy a csíkokat helyesen szerelték össze (pl. a csíkot a megfelelő orientációban helyezték a kazettába), és a nitrocellulózon nincsenek olyan hibák vagy karcolások, amelyek az összeszerelési folyamat során keletkezhettek.

Egyes vizsgálatokhoz nincs szükség mennyiségi leolvasásra, és a csík futtatásához elegendő lehet a mérőlap formátum. Ebben a formátumban nincs minta- vagy konjugáltömb, és a csíkot függőlegesen, közvetlenül a folyékony mintába helyezik. Az ilyen formátumú csíkokat nem műanyag kazettába helyezik, hanem fedőszalagot használnak az áramlás szabályozására és a csík összes komponensének összetartására. Ezt a következő modulban ismertetjük részletesebben.