Samling af lateral flow-teststrimler

Samlingen af en lateral flow-teststrimmel kan variere fra fuldt automatiseret til helt manuel. Drivkraften for valget af fremstilling er tid og omkostninger. Ved fremstilling i stor skala (f.eks. >1 million pr. år) kan brugen af automatisering reducere de samlede omkostninger pr. strimmel betydeligt. Et eksempel på denne type automatisering er BioDot Reel-to-Reel Dispensing Systems.

Biodot Lateral Flow Automated Manufacturing

Laminering

Laminering er betegnelsen for samling af alle lateral flow-strimmelkomponenterne til en enkelt vare. Denne samling begynder med bagsidekortet. Bagsidekort er typisk fremstillet af vinyl med et akrylklæbemiddel på den ene side, som er dækket af en præcisionsskåret slipfolie. Hver komponent, der samles på bagkæden, vil typisk have sin egen specielle slipfolie. Nedenfor er et eksempel på, hvordan release liner til nitrocellulosemembranen, som typisk er i midten af bagkortet, trækkes tilbage, inden membranen klæbes på bagkortet.

Laminering af bagkort til nitrocelluloseassay

Rækkefølgen, i hvilken et bagkort lamineres med komponenterne til lateral flow strip, er meget vigtig. Typisk vil nitrocellulosemembranen blive lamineret på bagsidekortet først, da den skal være under både vægepuden og prøvepuden, for at den kapillære strømning kan fungere som ønsket. Når nitrocellulosemembranen er blevet lamineret på bagsidekortet, kan man fjerne klæbelineren til enten konjugatpuden eller den absorberende pude og laminerer begge dele. Hver af disse komponenter skal have et vist overlap med nitrocellulosemembranen. Når disse tre komponenter er blevet lamineret, påføres prøvepuden. Prøvepuden skal overlappe med konjugatpuden, for at prøven kan overgå til konjugatpuden, hvorefter konjugatet frigøres og flyder på membranen sammen med prøven. Selv om laminering kan udføres i hånden, er det almindeligt at bruge en lamineringsmaskine som Kinematic Matrix 2210.

Kinematic Matrix 2210 Laminator

Med brug af vakuum til at holde materialet på plads og en lamineringsnøgle til at sikre, at materialerne lamineres i præcis den rigtige position, samles bagbeklædningerne med høj reproducerbarhed. Når bagkortet er blevet samlet fuldt ud, kaldes det nu for et “masterkort”.

Skæring

Når alle komponenterne til lateralflowstrimler er blevet lamineret på bagkortet, er masterkortet nu klar til at blive skåret i strimler. En automatiseret guillotine kan bruges til at skære strimler præcist og med en høj grad af reproducerbarhed.

Biodot Guillotine CM5000

Når alle lateral flow strip-komponenterne er blevet lamineret på bagsidekortet, er masterkortet nu klar til at blive skåret i strimler. En automatiseret guillotine kan anvendes til nøjagtigt at skære strimler med en høj grad af reproducerbarhed.

De to mest almindelige problemer under skæring er variationer i strimlernes bredde og flossede kanter. Strimmelbredden kan verificeres med præcisionsmålere, og det bør gøres konsekvent, både når man begynder at skære et mastercard og under hele skæringsprocessen for at sikre ensartethed. Udkradsede kanter er typisk et biprodukt af, at guillotinebladet bliver sløvt med tiden, og det vil have en negativ indvirkning på køreforholdene. Det er vigtigt at rense og slibe guillotinebladet regelmæssigt. Strimlernes bredde kan variere afhængigt af de specifikke testkrav. Tyndere strimler er mere omkostningseffektive (større antal strimler pr. kort), men kan være mindre nøjagtige på grund af kanteffekter. Kvantitative analyser skæres oftest i en bredde på 5-6 mm.

Kassette

Kassetten, der rummer teststrimlen, kan være en af de mest kritiske komponenter for at opnå et reproducerbart og pålideligt later flow-assay, og den er især vigtig for kvantitative test. Kassetten sørger for flowkontrol ved at lægge tryk på de relevante punkter på teststrimlen for at sikre, at al væsken passerer gennem teststrimlen med samme flowhastighed. Den sikrer også, at væsken flyder gennem teststrimmens materialer i stedet for kun at passere over toppen af strimlen eller flyde langs kanterne. Typisk konstrueres kassetterne, efter at alle materialer er blevet udvalgt og optimeret, og det er vigtigt at tilpasse kassetten til de enkelte komponenters længder, bredder og tykkelser. Trykpunkter ved materialesammenføjninger styrer prøvevæskens strømningshastighed, hvilket giver mulighed for længere eller kortere inkubationstider for konjugatet med prøveanalyt. Til produktion i stor skala er det nødvendigt med en specialudviklet kassette fra en erfaren industriel designvirksomhed, fortrinsvis en virksomhed, der allerede har ekspertise inden for lateral flow-kassetter. Til indledende afprøvning kan det være tilstrækkeligt at anvende eksisterende generiske kassetter. Automatiseret kassettemontering er mulig, men traditionelt udføres monteringen manuelt ved hjælp af en kassettemonteringsrulle. Samlingsrullen bruger en båndfremfører til at flytte kassetterne gennem en rulle, der påfører et ensartet tryk på tværs af det øverste hus for at lukke kassetten. Det er altid bedst at kontrollere alle slutprodukter visuelt for at sikre, at strimlerne er blevet samlet korrekt (f.eks. at strimlen blev placeret i kassetten i den korrekte retning), og at nitrocellulosen ikke har nogen pletter eller ridser, der kan være opstået under samleprocessen.

For nogle assays er en kvantitativ aflæsning ikke nødvendig, og et dipstick-format kan være tilstrækkeligt til at køre strimlen. I dette format er der ingen prøve- eller konjugatblok, og striben placeres oprejst direkte i den flydende prøve. Strips i dette format anbringes ikke i en plastikkassette, og i stedet anvendes afdækningstape til at sikre flowkontrol og til at holde alle strippens komponenter sammen. Dette er beskrevet yderligere i næste modul.