Fria ribosomer i fysiologiskt icke-delande celler. Mänskliga perifera lymfocyter

Ribosomer i fysiologiskt icke-delande mänskliga perifera blodlymfocyter studerades genom ultravioletta absorbansmätningar av cytoplasmaextrakt som utsattes för ultracentrifugering i sackarosgradienter vid hög och låg jonstyrka. Minst 70 % av de totala cytoplasmatiska ribosomerna var fria ribosomer som sedimenterade vid 80 S i lågt salt och dissocierades till 40 S- och 60 S-underenheter i högt salt. Dessa partiklar var inte inblandade i proteinsyntesen. De återstående ribosomerna var jämnt fördelade mellan nativa underenheter, aktiva monosomer och större polysomer. Fria ribosomer visades existera som 80 S-partiklar i den intakta cellen, och märkningsstudier visade att de inte fritt återvände till pooler av proteinsyntetiserande komponenter. Nya ribosomer uppträdde först som naturliga underenheter och i polysomer. Efter en fördröjning på 15 till 20 minuter började partiklarna att gå in i den fria ribosompoolen. Fria ribosomer uppstår alltså i den vilande cellen genom ett enkelriktat flöde som kontinuerligt tar bort partiklar från den proteinsyntetiserande poolen och avskiljer dem som en ansamling av inaktiva 80 S-partiklar. Övergången från ursprungliga underenheter till fria ribosomer åtföljs av funktionella förändringar i underenheternas associationsbeteende och av en förändring av underenheternas sedimenteringsbeteende. Dessa förändringar kan bero på att de fria ribosomerna saknar ett eller flera proteiner som krävs för att möjliggöra en effektiv dissociation av subenheterna innan översättningen inleds. Brist på denna dissocieringsfaktor kan vara orsaken till den kontinuerliga bildningen av fria ribosomer i vilande celler. Våra uppgifter tyder också på en begränsning av initieringshastigheten för proteinsyntesen som kan bero på brist på en initieringsfaktor.