3.4.2 Cromatografia de gás quiral

Separação dos enantiómeros da anfetamina, metanfetamina, MDA, MDMA e MDEA por GC usando diferentes fases estacionárias foi descrita . A separação dos derivados de l-TPC foi descrita nas colunas DB-1 (metil silicone reticulado) e DB-17 (50% fenil metil silicone) equivalentes a GC. As condições de GC para a coluna DB-17 foram uma temperatura inicial do forno de 120-210°C a 30°C/min, depois a 260°C a 6°C/min e mantida por 1 min. Usando a coluna DB-1 as condições eram de 130°C a 190°C a 4°C/min, depois a 250°C a 25°C/min e mantidas por 2 min. Em ambos os casos, as temperaturas da porta de injecção e da interface foram de 270°C. Os íons monitorados foram m/z 237 para anfetamina e MDA, m/z 241 para anfetamina D5 e MDA-D5, m/z 251 para metanfetamina e MDMA, m/z 255 para metanfetamina D5 e MDMA-D5, m/z 265 para MDEA e m/z 270 para MDEA-D5. O método pode ser usado para separar e identificar os enantiômeros de cada um dos analitos em concentrações que variam de 5 a 10.000 ng/mL em toda a faixa (0-100%) de cada enantiômero. Todos os picos de enantiômeros foram facilmente separados na coluna DB-1, mas no DB-17, os d-enantiômeros de MDMA e MDEA não foram resolvidos. Embora isso causasse um problema com muitos detectores de GC, o espectrômetro de massa foi facilmente capaz de monitorar seletivamente os íons únicos para cada um dos analitos e distingui-los uns dos outros. Além disso, é improvável que se encontre tanto MDMA como MDEA abusados ao mesmo tempo, portanto, a probabilidade de uma amostra ter ambos os compostos neles seria baixa. Na descrição da análise dos enantiômeros MDEA, Paul et al. indicaram um problema com interferência iônica comum que impedia o uso de mais de um íon para aquele analito, apesar do uso de um reagente derivado e condições de GC diferentes.

Outros investigadores também relataram a separação de enantiômeros usando derivados de prolílo quiral .

Fallon et al. relataram a disposição enantiomérica de MDMA e metabólitos após a administração de MDMA (40 mg) a oito voluntários saudáveis seguidos pela coleta de amostras de urina e plasma. Após a extração, as drogas foram derivadas usando MTPA, e cromatografadas em uma coluna DB-17 a 50°C por 2 min a 250°C a 25°C/min e depois a 290°C a 2°C/min usando NPD para detecção. As amostras de plasma foram extraídas, derivatizadas e cromatografadas em uma coluna DB-1 equivalente (HP ultra 1) a 100°C por 3 min a 285°C a 15°C/min e mantidas por 5 min e analisadas pela EM. Iões a m/z 119, 139, 162, 189, 260 para anfetamina, 135, 162, 189, 260 para MDA, 135, 162, 189, 260 para MDMA foram usados para detectar os compostos de interesse. A quantificação foi realizada usando m/z 162 para os fármacos e m/z 148 para o padrão interno metoxifenamina. O ensaio mostrou estreita concordância entre a composição do enantiômero real e medida em três concentrações diferentes e quatro razões diferentes.

MTPA foi utilizado por vários outros autores (como observado anteriormente) para a análise de anfetaminas e compostos relacionados. Usando um DB-5MS (20 m × 0,18 mm i.d.; J&W Scientific Rancho Cordova, CA, EUA) e condições GC de: temperatura da porta injetora 140°C. A temperatura inicial do forno foi ajustada para 140°C durante 0,5 min e depois para 215°C a 15°C/min e depois para 285°C a 35°C/min e mantida durante 1 min. A temperatura da linha de transferência foi mantida em 280°C. Este método foi utilizado para a separação de enantiômeros anfetamínicos e metanfetamínicos. Os enantiômeros de metanfetaminas foram separados por 0,07 min a um tempo de retenção de >7 min, colocando os enantiômeros dentro de 1% um do outro, um requisito comum para variação aceitável do tempo de retenção dentro de uma execução analítica. Como ambos os enantiômeros se eluem juntos, é importante avaliar cuidadosamente qual pico de enantiômero está sendo avaliado pelo sistema de dados do instrumento. O procedimento deu desvios padrão relativos, em três concentrações diferentes (500, 2000 e 4000 ng/mL) de 0,4-7,2% para anfetaminas e de 0,5 a 4,0% para metanfetaminas. O ensaio, usando uma regressão ponderada de 1/X, deu um intervalo linear de 25-10.000 ng/mL. Um procedimento similar foi descrito para a análise de MTPA derivatizada anfetamina, metanfetamina, MDA, MDMA e MDEA em uma coluna capilar de fenil polissiloxano a 5% (15 m × 0,25 mm i.d.; J&W Scientific Rancho Cordova) usando as seguintes condições GC: A temperatura do forno foi aumentada de 140°C durante 0,5 min para 215°C a 15°C/min durante 1,5 min para 285°C a 35°C/min onde foi mantida durante 1,0 min. A temperatura do injector e da linha de transferência foi de 160°C e 260°C, respectivamente. O ensaio deu uma faixa linear de 25-5.000 ng/mL para MDEA e 25-10.000 ng/mL para anfetamina, metanfetamina, MDA, MDMA. A variação na concentração de corte (500 ng/mL) foi de ±11% para todos os analitos.

Peters et al. descreveram um ensaio de ion ionização química negativa GC-MS para determinação de enantiômeros de anfetaminas e metanfetaminas em plasma ou soro. Os enantiômeros foram derivatizados com cloreto de S-heptafluorobutilenoglicol e separados com um GC. O método foi linear de 5 a 250 μg/L com eficiências de extração de 88,9-98,6% usando uma extração simples em fase sólida. As condições de GC foram as seguintes coluna de 5% de fenil-metil-siloxano (HP-5MS; 30 m×0,25 mm i.d.); temperatura da porta de injeção, 280°C; temperatura da coluna, 100°C aumentada para 180°C a 30°C/min, para 230°C a 5°C/min, e para 310°C a 30°C/min, linha de transferência, 280°C; NICI, metano (2 mL/min); temperatura da fonte, 150°C. Os íons monitorados foram: m/z 399, 379 e 439 para anfetaminad11, e m/z 388, 368 e 428 para anfetamina; (EMV aumentado em 400 V) m/z 407, 387 e 447 para metanfetaminad5 e m/z 402, 382 e 442 para metanfetamina. O aumento da sensibilidade proporcionado pela ionização química negativa permitiu o uso de uma amostra de 0,2 mL. Em uma publicação posterior descrevendo o perfil metabólico da MDMA após a administração da droga em um estudo controlado pelo mesmo autor, também foi delineada uma validação completa do ensaio. Em outro procedimento usando NICI Leis et al. também descreveram um método para a análise quantitativa de enantiômeros anfetamínicos em plasma humano por GC/MS de ion ionização química negativa. O método foi linear dentro de uma faixa de 0,006-50 ng/mL. Após uma simples extração líquida de 1 mL de plasma e derivatização com (S)-heptafluorobutil cloreto de polietilenoglicol utilizado: SGE-BPX5 coluna capilar de sílica fundida (15 m×0,25 mm i.d.; ThermoQuest), injetor 280°C, temperatura da coluna foi 100°C durante 1 min, seguido por um aumento de 40°C/min para 180°C, 5°C/min de 180-195°C, 40°C/min para 310°C durante 2 min, linha de transferência 315°C. A ionização química foi realizada com metano com uma corrente de emissão de 300 mA. Os íons monitorados para este estudo farmacocinético foram m/z 368,1 e 373,1 para anfetamina e padrão interno, respectivamente.

Análise de MDMA e regioisômeros relacionados foi descrita por vários autores, ajudando a garantir que estes compostos intimamente relacionados possam ser prontamente diferenciados. A combinação das características espectrais de massa e particularmente o comportamento cromatográfico desses analitos são descritos por ambos os grupos em relação à sua importância para a correta identificação desses compostos. A otimização mostrou que taxas de programa muito lentas deram a melhor separação em fases estacionárias não polares, mas o tempo de execução para cima de 85 min foi impraticável. O uso de colunas capilares de furo estreito com as mesmas fases melhorou o tempo de análise para aproximadamente meia hora devido ao seu maior poder de resolução. A otimização de um DB-35MS, uma coluna de fase polar estacionária, permitiu a resolução de 10 regioisômeros de cadeia lateral e anel de MDMA em aproximadamente 4,5 min .