Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

  • Co to jest test ELISA?
  • Do czego służy test?
  • Jak działa test ELISA?
  • Jak przygotować się do testu
  • Co obejmuje test?
  • Wyniki i ich znaczenie
  • Co może wpłynąć na wynik testu?

Co to jest test ELISA?

An ELISA lub enzyme-linked immunosorbent assay, jest metodą stosowaną w laboratorium do pomocy w diagnostyce szerokiego zakresu chorób. Test ten jest wykonywany na krwi lub moczu i służy do pomiaru ilości określonego białka lub substancji w tych płynach ustrojowych, takich jak czynniki zakaźne, alergeny, hormony lub leki.

Test ten opiera się na interakcji pomiędzy składnikami układu odpornościowego zwanymi antygenami i przeciwciałami. Przeciwciała są białkami produkowanymi przez organizm w celu identyfikacji i neutralizacji wszelkich obcych substancji, które mogą zostać napotkane, takich jak wirusy i bakterie. Substancje, przeciwko którym wytwarzane są przeciwciała, znane są jako antygeny, ponieważ stymulują one odpowiedź immunologiczną.

Do czego wykorzystywany jest ten test?

Lizy ELISA są wykorzystywane do wielu rodzajów testów w laboratorium, które mogą pomóc w diagnostyce wielu różnych schorzeń.

Jest on najczęściej wymagany, jeśli podejrzewa się, że byłeś narażony na kontakt z wirusami, takimi jak HIV i zapalenie wątroby typu B lub C, lub bakteriami i infekcjami pasożytniczymi, takimi jak toksoplazmoza, choroba z Lyme i Helicobacter pylori. Może również zmierzyć poziom przeciwciał, aby sprawdzić, czy zostałeś zaszczepiony przeciwko niektórym chorobom, takim jak świnka i różyczka.

Inne zastosowania testu ELISA obejmują:

  • Pomiar poziomu niektórych hormonów, takich jak HCG w teście ciążowym, hormony tarczycy
  • Wykrywanie kurzu i alergii pokarmowych
  • Wykrywanie nielegalnych narkotyków, takich jak kokaina i metamfetamina.
  • Mierzenie przeciwciał, które są produkowane w chorobach autoimmunologicznych, takich jak toczeń i reumatoidalne zapalenie stawów.

Niektóre zestawy są również dostępne dla ogółu społeczeństwa do użytku na przykład; domowy test ciążowy jest oparty na zasadzie ELISA i wykrywa obecność hormonu znanego jako ludzka gonadotropina kosmówkowa (hCG), który jest wydzielany w moczu kobiety w ciąży.

Jak działa test ELISA?

Istnieje kilka odmian testu ELISA w zależności od tego, czy wykrywane są przeciwciała czy antygeny.

Jeśli wykrywane są przeciwciała, na przykład przeciwko wirusowi HIV, wówczas część wirusa HIV jest przymocowana do powierzchni stałej, takiej jak probówka lub płytka. Będzie to działać jako antygen. Twoja surowica zostanie następnie dodana do probówki i jeśli zawiera ona przeciwciała przeciwko antygenowi, to zwiąże się z nim. Następnie dodawane jest inne przeciwciało, które rozpoznaje przeciwciała HIV i wiąże się z każdym związanym przeciwciałem. To drugie przeciwciało jest połączone z substancją chemiczną zwaną enzymem (enzym przyspiesza reakcję chemiczną), a w ostatnim etapie dodawana jest substancja, która reaguje z enzymem na przeciwciało, wytwarzając zabarwiony produkt. Jeśli test jest pozytywny, wystąpi reakcja barwna. Jeśli nie masz przeciwciał na dany antygen, reakcja nie wystąpi i nie będzie widoczna zmiana koloru.

Jak przygotować się do testu

Nie jest wymagane żadne przygotowanie.

Co obejmuje test?

Test ten zwykle wymaga pobrania krwi z żyły lub próbki moczu.

Wyniki i ich znaczenie

Większość testów ELISA daje wynik pozytywny lub negatywny, albo organizm ma przeciwciało albo nie. Niektóre inne są półilościowe i podawana jest wartość, jak w przypadku pomiaru poziomu hormonów.

Co może wpłynąć na wynik testu?

Wadą testu ELISA jest występowanie wyników fałszywie dodatnich lub fałszywie ujemnych, dlatego w wielu przypadkach wykonuje się po nim test potwierdzający. Na przykład test ELISA na HIV i boreliozę może często dawać wynik fałszywie pozytywny, dlatego też na wszystkich pozytywnych próbkach przeprowadza się również inny rodzaj testu, aby to zweryfikować. Wynik fałszywie pozytywny może wystąpić, jeśli masz chorobę podstawową, taką jak toczeń lub choroba reumatoidalna.

Wynik negatywny nie zawsze oznacza brak infekcji, ponieważ niektóre przeciwciała nie są wytwarzane natychmiast po infekcji. Przeciwciała przeciwko HIV nie pojawiają się we krwi do 6 tygodni po ekspozycji na wirusa, dlatego zaleca się, aby w przypadku podejrzenia, że byłeś narażony na zakażenie, powtórzyć test po trzech miesiącach.

  1. Branson BM. State of the art for diagnosis of HIV infection. 2007. Clin. Infect. Diseases. 45: Suplement 4:S221-5
  2. Prescott LM, Harley JP and Klein DA. Microbiology. Wm. C. Brown publishers. Dubuque, IA. 1996
  3. Staffan P, Perlmann H, Bermenn P. 2005. Encyklopedia nauk przyrodniczych. Enzyme-linked immunosorbent assay. Published online 27/1/2006
    http://mrw.interscience.wiley.com.dbgw.lis.curtin.edu.au

.