Free ribosomes in physiologically nondividing cells. Human peripheral lymphocytes

Ribosomen van fysiologisch niet-delende menselijke perifere bloedlymfocyten werden bestudeerd door ultraviolet absorptiemetingen van cytoplasmatische extracten onderworpen aan ultracentrifugatie in sucrose gradiënten bij hoge en lage ionensterkte. Minstens 70% van de totale cytoplasmatische ribosomen waren vrije ribosomen die sedimenteerden bij 80 S in laag zout en dissocieerden tot 40 S en 60 S subeenheden in hoog zout. Deze deeltjes waren niet betrokken bij de eiwitsynthese. De resterende ribosomen waren gelijkelijk verdeeld over natieve subeenheden, actieve monosomen, en grotere polysomen. Vrije ribosomen bleken te bestaan als 80 S deeltjes in de intacte cel, en labeling studies gaven aan dat ze niet vrijelijk terugkeerden naar de pools van eiwitsynthetiserende componenten. Nieuwe ribosomen verschenen eerst als natieve subeenheden en in polysomen. Na een vertraging van 15 tot 20 min, begonnen de deeltjes in de vrije ribosomenpool terecht te komen. Dus, vrije ribosomen ontstaan in de rustende cel door een eenrichtingsstroom die continu deeltjes verwijdert uit de eiwit-synthetiserende pool en ze sequestreert als een opeenhoping van inactieve 80 S deeltjes. De overgang van natieve subeenheden naar vrije ribosomen gaat gepaard met functionele veranderingen in het associatiegedrag van subeenheden en met een verandering van het sedimentatiegedrag van de subeenheden. Deze veranderingen kunnen het gevolg zijn van de afwezigheid van een eiwit of van eiwitten in de vrije ribosomen, die nodig is om een effectieve dissociatie van de subeenheden mogelijk te maken vóór het begin van de translatie. Een tekort aan deze dissociatiefactor kan verantwoordelijk zijn voor de voortdurende vorming van vrije ribosomen in rustende cellen. Onze gegevens suggereren ook een beperking van de snelheid van initiatie van eiwitsynthese die het gevolg kan zijn van deficiëntie van een initiatiefactor.