3.4.2 Chiral Gas Chromatography

Amphetamine, methamphetamine, MDA, MDMA および MDEAのエナンチオマーを異なる固定相でGC分離することが記述されています . DB-1（架橋メチルシリコーン）とDB-17（50%フェニルメチルシリコーン）相当のGCカラムでl-TPC誘導体の分離を説明しました。 DB-17カラムのGC条件は、初期オーブン温度120-210℃、30℃/分、その後260℃、6℃/分、1分間保持でした。 DB-1カラムを用いた場合の条件は、130℃～190℃、4℃/分、その後250℃、25℃/分、2分保持でした。 いずれの場合も、注入口および界面温度は270℃であった。 モニターしたイオンは，アンフェタミンとMDAがm/z 237，アンフェタミン-D5とMDA-D5がm/z 241，メタンフェタミンとMDMAがm/z 251，メタンフェタミン-D5とMDMA-D5がm/z 255，MDEA がm/z 265，MDEA-D5 がm/z 270であった。 このメソッドは，各エナンチオマーの全範囲 (0-100%) にわたって，5 ～ 10,000 ng/mL の濃度範囲で分離および同定に使用することができました． DB-1カラムではすべてのエナンチオマーピークが容易にベースライン分離されましたが、DB-17ではMDMAとMDEAのd-エナンチオマーが分離されませんでした。 これは多くのGC検出器では問題となりますが、質量分析計ではそれぞれの分析物について固有のイオンを選択的にモニターし、互いに区別することが容易にできました。 また、MDMAとMDEAの両方が同時に乱用されることはほとんどないため、両方の化合物を含む試料が存在する可能性は低くなります。 MDEAのエナンチオマーの分析に関する記述において、Paulらは、異なる誘導体化試薬とGC条件を使用したにもかかわらず、その分析対象に対して単一以上のイオンを使用できない共通イオン干渉の問題を指摘しています。

他の研究者もキラルプロリル誘導体を用いたエナンチオマー分離を報告しています。

Fallonらは、8人の健康なボランティアにMDMA（40 mg）を投与し、尿と血漿を採取した後のMDMAと代謝物のエナンチオマー体内分布を報告しています。 抽出後、薬物をMTPAで誘導体化し、DB-17カラムで50℃、2分、250℃、25℃/分、290℃、2℃/分でクロマトグラフィーし、NPDで検出しました。 血漿試料を抽出、誘導体化し、DB-1相当（HP ultra 1）カラムで100℃、3分→285℃、15℃/分、5分保持でクロマトグラフ処理し、MSで分析しました。 アンフェタミンではm/z 119, 139, 162, 189, 260、MDAでは135, 162, 189, 260、MDMAでは135, 162, 189, 260のイオンで目的化合物を検出しました。 定量は，薬物のm/z 162と内部標準物質のメトキシフェナミンのm/z 148を用いて行われた。 このアッセイは、3つの異なる濃度と4つの異なる比率で、実際のエナンチオマー組成と測定値の間に密接な一致を示しました。

MTPA は、アンフェタミンと関連化合物の分析に、他の多くの著者によって使用されています（前述のとおり）。 DB-5MS (20 m × 0.18 mm i.d.; J&W Scientific Rancho Cordova, CA, USA) とGC条件: インジェクターポート温度140℃を使用しました。 初期オーブン温度は140℃で0.5分、その後15℃/分で215℃、35℃/分で285℃に設定し、1分間保持した。 搬送ライン温度は280℃に維持した。 この方法は、アンフェタミンとメタンフェタミンのエナンチオマーの分離に使用されました。 メタンフェタミンのエナンチオマーは、>7分の保持時間で0.07分分離され、エナンチオマーは互いに1%以内となり、分析ラン内の許容できる保持時間のばらつきの一般的な要件が満たされました。 両エナンチオマーは接近して溶出するため、装置のデータシステムでどのエナンチオマーのピークが評価されているかを慎重に判断することが重要です。 この手順により、3つの異なる濃度（500、2000、4000 ng/mL）での相対標準偏差は、アンフェタミンで0.4～7.2%、メタンフェタミンで0.5～4.0%となりました。 1/X加重回帰を用いた測定では、25〜10,000 ng/mLの直線範囲が得られました。 同様の手順で、5%フェニルポリシロキサンキャピラリーカラム (15 m × 0.25 mm i.d.; J&W Scientific Rancho Cordova) で、MTPA誘導体化アンフェタミン、メタンフェタミン、MDA、MDMA、MDEAを以下のGC条件で分析した結果を記載しました。 オーブン温度は140℃、0.5分、215℃、15℃/分、1.5分、285℃、35℃/分、1.0分と上昇させました。 インジェクター温度は160°C、トランスファーライン温度は260°Cで した。 MDEAは25-5,000 ng/mL，アンフェタミン，メタンフェタミン，MDA，MDMAは25-10,000 ng/mLの直線性を示しました。 Petersらは血漿・血清中のアンフェタミンとメタンフェタミンのエナンチオマーを定量するための負イオン化学イオン化GC-MSアッセイを発表しました。 エナンチオマーはS-heptafluorobutyrylprolyl chlorideで誘導体化され、GCで分離されました。 本法は5〜250μg/Lの範囲で直線的であり，単純な固相抽出を用いて88.9〜98.6%の抽出効率を示した。 GCの条件は以下の通りです。 5%フェニルメチルシロキサンカラム (HP-5MS; 30 m×0.25 mm i.d.); 注入口温度 280°C; カラム温度 100°C 30°C/min で 180°C, 5°C/min で 230°C, 30°C/min で 310°C, トランスファーライン 280°C; NICI, メタン (2 mL/min); 源温度 150°C. アンフェタミンd11のm/z 399, 379, 439とアンフェタミンのm/z 388, 368, 428、（EMVが400V増加）メタンフェタミンd5のm/z 407, 387, 447とメタンフェタミンのm/z 402, 382, 442がモニターされました。 負イオン化学イオン化により感度が向上したため、0.2 mLのサンプルサイズを使用することができました。 同じ著者による対照試験でMDMAを投与した後の代謝プロファイルを記述したその後の出版物では、このアッセイの徹底的な検証も行われました。 NICIを使用した別の手順で、Leisらは、GC/負イオン化学イオン化MSによるヒト血漿中のアンフェタミンエナンチオマーの定量分析法についても記述しています。 この方法は、0.006-50 ng/mL の範囲で直線的でした。 血漿1mLを液体抽出し、(S)-ヘプタフルオロブチリルプロリルクロリドで誘導体化した後、GC条件を使用しました。 SGE-BPX5溶融シリカキャピラリーカラム（15 m×0.25 mm i.d.; ThermoQuest）、インジェクター280℃、カラム温度100℃1分、180℃まで40℃/分、180-195℃まで5℃/分、310℃2分40℃/分、トランスファーライン315℃の条件で行いました。 化学イオン化はメタンで行い、エミッション電流は300mAとした。 この薬物動態研究でモニターされたイオンは、アンフェタミンと内部標準のそれぞれ m/z 368.1 と 373.1 でした。

MDMA と関連する位置異性体の分析については、複数の著者によって説明されており、これらの密接に関連する化合物を容易に区別できるようにするのに役立ちます。 これらの化合物の適切な識別のための重要性に関連して、質量スペクトルの特性および特にクロマトグラフィー挙動の組み合わせが、両グループによって記述されています。 最適化により、非極性固定相では非常に遅いプログラム速度が最良の分離をもたらすことが示されましたが、85分以上のランタイムは実用的ではありませんでした。 同じ相の細径キャピラリーカラムを使用すると、分離能が向上し、分析時間が約30分に短縮されました。 極性固定相カラムであるDB-35MSの最適化により、MDMAの側鎖および環領域異性体10種を約4.5分で分離することができた

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