Il pannello diagnostico CDC 2019 Novel Coronavirus (2019-nCoV) Real-Time Reverse Transcriptase (RT)-PCR rileva il virus SARS-CoV-2 nei campioni delle vie respiratorie superiori e inferiori. È progettato per essere utilizzato con un esistente strumento di test RT-PCR comunemente usato per testare il virus dell’influenza stagionale.

La Food and Drug Administration (FDA) degli Stati Uniti ha dato l’autorizzazione all’uso di emergenza (EUA) per questo test il 4 febbraio 2020. Le istruzioni per l’uso autorizzate dalla FDA del pannello diagnostico contengono informazioni sul test, il suo uso previsto, la procedura di test e le caratteristiche delle prestazioni. Il sito web EUA icona esterna ha pubblicato la lettera di autorizzazione FDA icona esterna per il pannello diagnostico. La lettera definisce l’uso autorizzato e le condizioni di autorizzazione che si applicano a CDC e ai laboratori di prova che utilizzano questo test.

Il 12 giugno 2020, FDA ha concesso una modificaexternal icon all’EUA per il test diagnostico CDC per affrontare le carenze globali di materiali necessari per eseguire il test. Questo emendamento fornisce alternative per l’elaborazione del test:

• Quattro reagenti di estrazione aggiuntivi che possono essere utilizzati nei metodi di estrazione esistenti
• Uno strumento di estrazione aggiuntivo e reagenti associati
• Un nuovo processo che può essere utilizzato al posto del metodo di estrazione quando i materiali per il metodo attuale sono limitati

Il 13 luglio, 2020, la FDA ha concesso una modifica, per aggiungere il Promega Maxwell® RSC 48 come strumento di estrazione autorizzato per l’uso con il pannello diagnostico CDC 2019-nCoV rRT-PCR.

Il 1° dicembre 2020, la FDA ha autorizzato un emendamento-icona esterna per aggiungere:

• L’opzione di condurre test su campioni raggruppati per campioni di tamponi delle vie respiratorie superiori
• Dati di prestazione generati con il pannello di riferimento della FDA
• Promega Maxwell® CSC 48 come opzione di estrazione dei campioni

Come ordinare il pannello Real-Time Reverse Transcriptase (RT)-PCR Diagnostic Panel

L’icona esterna International Reagent Resource (IRR)sta distribuendo il pannello diagnostico e le forniture ai laboratori di salute pubblica statali e locali registrati in modo che possano eseguire test per la SARS-CoV-2.

Durante la pandemia di SARS-CoV-2, i laboratori statali di salute pubblica possono autorizzare i laboratori di contea o di città in ogni stato ad eseguire i test. Questi laboratori devono essere certificati secondo il Clinical Laboratory Improvement Amendment (CLIA) per eseguire test ad alta complessità, avere attrezzature di laboratorio appropriate e formazione, e dimostrare la competenza dei test sotto la gestione del loro laboratorio statale per mantenere il loro status di laboratorio registrato all’IRR. L’IRR non fornisce direttamente ai medici, agli ospedali o agli operatori sanitari i kit per i test. I medici, gli ospedali e gli operatori sanitari dovrebbero fare riferimento all’elenco dei lotti disponibili in commercio di primer e icona probespdf che sono alternative accettabili ai reagenti forniti dal CDC. L’elenco inizia a pagina 7 nelle istruzioni per l’uso del pannello diagnostico autorizzato CDC 2019-nCoV Real-Time RT-PCR.

Materiali inclusi nel pannello diagnostico

Il pannello diagnostico CDC 2019-nCoV Real-Time RT-PCR contiene quattro reagenti:

• Tre miscele primer-sonda per:
  • 2019-nCoV_N1: ha come obiettivo il gene della nucleocapside del virus (N) per il rilevamento specifico della SARS-CoV-2
  • 2019-nCoV_N2: ha come obiettivo il gene della nucleocapside del virus (N) per il rilevamento specifico della SARS-CoV-2
  • RP: ha come bersaglio il gene della RNasi P umana per il rilevamento di acidi nucleici umani; controllo dell’integrità del campione
• nCoVPC: materiale di controllo positivo non infettivo; fornisce un risultato positivo in ogni test incluso nel pannello

Se il pannello diagnostico non è disponibile, vedere le istruzioni aggiornate per l’icona esterna per alternative accettabili.

Altri materiali di cui i laboratori avranno bisogno per eseguire il pannello diagnostico

Il pannello diagnostico CDC 2019-nCoV Real-Time RT-PCR richiede l’uso di ulteriori materiali autorizzati che non sono inclusi nel test. Questi materiali includono reagenti PCR e oggetti comunemente usati nei laboratori clinici, come una microcentrifuga, provette per microcentrifuga, pipette e puntali per pipette. Essi sono descritti a partire da pagina 6 nel foglietto illustrativo del pannello diagnostico autorizzato CDC 2019-nCoV Real-Time RT-PCR. Sono inoltre necessari, ma non forniti, due materiali di controllo che devono produrre i risultati attesi affinché il test sia considerato valido, come indicato nelle Istruzioni per l’uso del pannello diagnostico CDC 2019-nCoV Real-Time RT-PCR (icona esterna). I controlli sono:

• Controllo del campione umano (HSC): Una preparazione di coltura cellulare umana usata come controllo della procedura di estrazione per dimostrare il successo del recupero dell’acido nucleico e l’integrità del reagente di estrazione. Alternative accettabili all’HSC sono elencate nel foglietto illustrativo.
• No Template Control (NTC): Acqua priva di nucleasi inclusa in ogni corsa. Controlla la contaminazione dei reagenti e del sistema.

Più risorse sul pannello diagnostico CDC

• Elenco dei primer e delle sonde commerciali accettabili
• Processo dei campioni di espettorato per l’estrazione dell’acido nucleico
• Icona RT-PCR Primers and Probes

Fact Sheets for CDC 2019-nCoV Real-Time RT-PCR Diagnostic Panel

• Patient Fact Sheetpdf icon
• Healthcare Provider Fact Sheetpdf icon