A CDC 2019-es új koronavírus (2019-nCoV) valós idejű reverz transzkriptáz (RT)-PCR diagnosztikai panelje kimutatja a SARS-CoV-2 vírust felső és alsó légúti mintákban. Úgy tervezték, hogy a szezonális influenzavírus vizsgálatára általánosan használt meglévő RT-PCR vizsgálóeszközzel használható legyen.

Az Egyesült Államok Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hivatala (FDA) 2020. február 4-én megadta a teszt sürgősségi felhasználási engedélyét (EUA). A diagnosztikai panel FDA által engedélyezett használati útmutatójakülső ikon tartalmazza a tesztre, annak rendeltetésszerű használatára, a vizsgálati eljárásra és a teljesítményjellemzőkre vonatkozó információkat. Az EUA weboldalonkülső ikonon közzétették az FDA engedélyező levelétkülső ikonon a diagnosztikai panelre vonatkozóan. A levél meghatározza az engedélyezett felhasználást és az engedélyezés feltételeit, amelyek a CDC-re és a tesztet alkalmazó vizsgáló laboratóriumokra vonatkoznak.

Az FDA 2020. június 12-én módosítottaexternal icon a CDC diagnosztikai tesztre vonatkozó EUA-t a teszt elvégzéséhez szükséges anyagok globális hiányának kezelése érdekében. Ez a módosítás alternatívákat biztosít a teszt feldolgozására:

• Négy további extrakciós reagens, amelyek felhasználhatók a meglévő extrakciós módszerekhez
• Egy további extrakciós eszköz és a kapcsolódó reagensek
• Egy új eljárás, amely az extrakciós módszer helyett használható, ha a jelenlegi módszerhez szükséges anyagok korlátozottak

Július 13-án, 2020, az FDA engedélyezte a módosítástkülső ikon, hogy a Promega Maxwell® RSC 48-at a CDC 2019-nCoV rRT-PCR diagnosztikai panellel való használatra engedélyezett extrakciós eszközként hozzáadja.

2020. december 1-jén az FDA engedélyezte a módosítástkülső ikon:

• A felső légúti tamponminták összevont mintatesztelésének lehetősége
• Az FDA referenciapanellel generált teljesítményadatok
• Promega Maxwell® CSC 48 mint mintaextrakciós lehetőség

Hogyan rendelhető a Real-Ideiglenes reverz transzkriptáz (RT)-PCR diagnosztikai panel

A Nemzetközi Reagensforrás (IRR)külső ikon a diagnosztikai panelt és a kellékeket a regisztrált állami és helyi közegészségügyi laboratóriumok számára terjeszti, hogy azok SARS-CoV-2 vizsgálatokat végezhessenek.

A SARS-CoV-2 világjárvány idején az állami közegészségügyi laboratóriumok engedélyezhetik az egyes államokban a megyei vagy városi laboratóriumokat a vizsgálatok elvégzésére. Ezeknek a laboratóriumoknak a CLIA (Clinical Laboratory Improvement Amendment) értelmében tanúsítvánnyal kell rendelkezniük a magas komplexitású vizsgálatok elvégzésére, megfelelő laboratóriumi felszereléssel és képzéssel kell rendelkezniük, és az állami laboratóriumuk felügyelete alatt bizonyítaniuk kell a vizsgálati jártasságot ahhoz, hogy IRR-regisztrált laboratóriumi státuszukat fenntartsák. Az IRR nem szállít közvetlenül klinikusoknak, kórházaknak vagy egészségügyi szakembereknek tesztkészleteket. A klinikusoknak, kórházaknak és egészségügyi szakembereknek a CDC által biztosított reagensek elfogadható alternatívájaként a kereskedelemben kapható primer és probespdf ikon tételek listájához kell fordulniuk. A lista a 7. oldalon kezdődik az engedélyezett CDC 2019-nCoV valós idejű RT-PCR diagnosztikai panel használati utasításkülső ikon Csomagmellékletben.

A diagnosztikai panelben

A CDC 2019-nCoV Real-Time RT-PCR diagnosztikai panel négy reagensből áll:

• három primer-szondakeverék:
  • 2019-nCoV_N1:
  • 2019-nCoV_N2: a vírus nukleokapszid (N) génjét célozza a SARS-CoV-2 specifikus kimutatására
  • RP: célpontja a humán RNáz P gén a humán nukleinsavak kimutatására; a minta integritásának ellenőrzése
• nCoVPC: nem fertőző pozitív kontrollanyag; pozitív eredményt ad a panelben szereplő minden egyes vizsgálatban

Ha a diagnosztikai panel nem áll rendelkezésre, lásd a frissített használati utasítástkülső ikon az elfogadható alternatívákról.

A diagnosztikai panel elvégzéséhez a laboratóriumoknak egyéb anyagokra lesz szükségük

A CDC 2019-nCoV Real-Time RT-PCR diagnosztikai panelhez további engedélyezett anyagok használata szükséges, amelyek nem tartoznak a teszthez. Ezek az anyagok közé tartoznak a PCR-reagensek és a klinikai laboratóriumokban általánosan használt eszközök, például mikrofúga, mikrocentrifugacsövek, pipetták és pipettahegyek. Ezek leírása a 6. oldaltól kezdődően található az engedélyezett CDC 2019-nCoV valós idejű RT-PCR diagnosztikai panel használati utasításbankülső ikon külső ikon betegtájékoztatójában. Két kontrollanyag is szükséges, de nem biztosított; ezeknek az anyagoknak a CDC 2019-nCoV Real-Time RT-PCR Diagnostic Panel Instructions for Useexternal ikonban leírtak szerint elvárt eredményeket kell produkálniuk ahhoz, hogy a teszt érvényesnek minősüljön. A kontrollok a következők:

• Human Specimen Control (HSC): Extrakciós eljárási kontrollként használt humán sejtkultúra-készítmény a nukleinsav sikeres kinyerésének, valamint az extrakciós reagens integritásának bizonyítására. A HSC elfogadható alternatívái a betegtájékoztatóban szerepelnek.
• No Template Control (NTC): Nukleázmentes víz, amely minden egyes futtatásban szerepel. Ellenőrzi a reagens és a rendszer szennyeződését.

Még több forrás a CDC diagnosztikai panelről

• Az elfogadható kereskedelmi primerek és próbák listájapdf ikon
• A köpetminták feldolgozása nukleinsav extrakcióhozpdf ikon
• Kizárólag kutatási célú RT.PCR primerek és próbák

Tájékoztatók a CDC 2019-nCoV valós idejű RT-PCR diagnosztikai panelhez

• Betegek adatlapjapdf icon
• Egészségügyi szolgáltató adatlapjapdf icon