Abstract

La mélioïdose et la morve sont causées par des espèces étroitement apparentées, Burkholderia pseudomallei et Burkholderia mallei, respectivement. Alors que la mélioïdose est une cause importante de morbidité en Asie du Sud-Est, la morve est extrêmement rare. Les efficacités de la ciprofloxacine et de la doxycycline ont été évaluées contre une souche de B. pseudomallei et une souche de B. mallei qui étaient sensibles aux deux antimicrobiens in vitro. Des souris Porton outbred et des hamsters syriens ont reçu 40 mg/kg de doxycycline ou de ciprofloxacine deux fois par jour par injection sous-cutanée, selon l’un des trois schémas suivants : administration commençant 48 heures avant la provocation et se poursuivant pendant 5 jours après la provocation ; traitement de 5 jours commençant immédiatement après la provocation ; traitement de 5 jours commençant 24 heures après la provocation. Des souris ont été exposées à B. pseudomallei 4845 et des hamsters ont été exposés à B. mallei 23344. L’efficacité antimicrobienne a été déterminée par le déplacement de la dose létale médiane (DLM). La prophylaxie par la ciprofloxacine et le traitement immédiat ont tous deux fait passer la DLM de B. pseudomallei de 19 cfu à 4 × 106 cfu chez les animaux non traités, mais la ciprofloxacine thérapeutique n’a fait passer la DLM qu’à 180 cfu. Les résultats pour la doxycycline étaient similaires. La prophylaxie par la ciprofloxacine a fait passer le DML de B. mallei 23344 à 4,6 × 105 ufc, contre 4 ufc chez les témoins non traités. Le traitement immédiat a fait passer le DML à 7,0 × 104 ufc et le traitement a fait passer le DML à 1,6 × 103 ufc. Tous les régimes de doxycycline ont protégé les hamsters contre des défis allant jusqu’à 2 × 107 cfu. Malgré l’utilisation d’une souche sensible de B. pseudomallei, aucun des deux antimicrobiens n’a été efficace lors de l’utilisation thérapeutique. L’administration opportune de l’un ou l’autre antimicrobien a toutefois permis de prévenir efficacement l’infection symptomatique. La doxycycline était le supérieur des deux antimicrobiens contre la morve expérimentale, bien qu’une rechute se soit produite chez les animaux traités environ 4 à 5 semaines après le défi.

Introduction

La mélioïdose et la morve sont causées par les espèces étroitement liées Burkholderia pseudomallei et Burkholderia mallei. Alors que la mélioïdose est une cause importante de mortalité et de morbidité dans le sud-est de l’Asie, le nord de l’Australie et le sous-continent indien, la morve est extrêmement rare et est généralement confinée à la maladie équine dans certaines parties du Moyen-Orient, de l’Asie et de l’Amérique du Sud.1,2

En conséquence, les sensibilités antimicrobiennes de B. pseudomallei ont été examinées à la loupe3-5 et la thérapie antimicrobienne de la mélioïdose est bien établie5,6. L’utilisation des fluoroquinolones pour le traitement de la mélioïdose a généralement été exclue en raison des CMI élevées in vitro pour certaines souches de B. pseudomallei, qui dépassent les niveaux pouvant être atteints dans le sérum.4,5 La ciprofloxacine, seule ou en association, a été utilisée dans le traitement de la mélioïdose malgré cette contre-indication7,8 car la ciprofloxacine peut pénétrer dans les cellules phagocytaires où réside B. pseudomallei, pour atteindre des concentrations 4 à 12 fois supérieures à la concentration extracellulaire9,10 . Ainsi, avec des taux sériques de 2 à 3 mg/L pouvant être atteints par une posologie orale standard, des concentrations intracellulaires allant jusqu’à 20 mg/L devraient théoriquement être atteintes.11 De plus, des taux sériques de 9 mg/L peuvent être atteints par perfusion iv, bien que pendant de courtes périodes.11 Une deuxième considération est que, peut-être, les fluoroquinolones peuvent être utiles pour le traitement immédiat ou comme prophylaxie pour les individus connus pour avoir été exposés, ou à haut risque d’exposition, à la mélioïdose, en particulier parce qu’il n’y a aucun moyen actuel d’immunoprophylaxie.

La rareté de la morve dans la seconde moitié de ce siècle signifie que les connaissances sur la sensibilité antimicrobienne de B. mallei, en particulier aux antimicrobiens modernes, sont rares, les quelques références dans la littérature microbiologique récente provenant principalement de sources russes12.-De même, l’efficacité in vivo des antimicrobiens modernes n’est pas bien connue. Des études récentes suggèrent que la sensibilité de B. mallei à la ciprofloxacine est similaire à celle de B. pseudomallei in vitro.19 De plus, B. pseudomallei et B. mallei sont très similaires en ce qui concerne leur antigénicité, leur biochimie et, très probablement, leur pathogénicité, notamment en ce qui concerne la survie intracellulaire.20 Les arguments en faveur de l’utilisation de la ciprofloxacine pour la mélioïdose s’appliqueraient donc à la morve mais, en même temps, il faut aussi tenir compte de ses faibles performances dans les études cliniques.

La doxycycline est utilisée seule dans le traitement de la mélioïdose localisée, et en association avec d’autres antimicrobiens5 pour la maladie systémique, elle peut donc avoir une certaine utilité comme traitement prophylactique ou immédiat de la mélioïdose. De plus, comme la ciprofloxacine, elle peut pénétrer de manière intracellulaire et est efficace contre une grande variété de pathogènes intracellulaires.21 Dans des expériences précédentes, la doxycycline a montré une bonne activité in vitro contre B. mallei.19

Les efficacités de la prophylaxie et du traitement immédiat par la ciprofloxacine et la doxycycline ont été mesurées contre la mélioïdose expérimentale dans un modèle murin et la morve expérimentale dans un modèle de hamster.

Matériaux et méthodes

Souches de provocation, stockage et culture

Les deux organismes sont classés par le Comité consultatif sur les agents pathogènes dangereux (ACDP) comme agents pathogènes de catégorie 3, ainsi toutes les procédures bactériologiques ont été effectuées dans des armoires de sécurité de catégorie 3 conformes à la norme BS5726.

B. pseudomallei NCTC 4845 et B. mallei ATCC 23344 ont été utilisés comme souches de provocation pour la mélioïdose et la morve, respectivement. Les deux espèces ont été stockées à -80°C sur un système de stockage de billes ‘Protect’ (TSC Ltd, Heywood, Lancashire, UK) jusqu’à ce qu’elles soient nécessaires. Les cultures de provocation et les dénombrements ont été cultivés sur de la gélose nutritive ou du bouillon nutritif et les études de sensibilité aux antimicrobiens in vitro ont été réalisées à l’aide du bouillon Mueller-Hinton.

Préparation des antimicrobiens

Pour les expériences in vitro, les poudres de doxycycline (Sigma, Poole, UK) et de ciprofloxacine (Bayer, Newbury, UK) ont été dissoutes dans de l’eau désionisée pour donner des solutions mères de 10 mg/l. Les solutions à administrer ont été préparées fraîchement chaque jour en dissolvant la poudre de doxycycline dans une solution saline tamponnée au phosphate et les comprimés de Ciproxin (Bayer) dans de l’eau désionisée puis en stérilisant par filtration les solutions.

Sensibilité aux antimicrobiens in vitro

Les bactéries ont été récupérées en plaçant cinq à six billes ‘Protect’ dans un bouillon Mueller-Hinton (Oxoid, Basingstoke, UK), et en incubant les cultures de façon statique à 37°C pendant 24 h pour B. pseudomallei et 48 h pour B. mallei. Une méthode de dilution sur plaque de microtitrage conforme aux directives du NCCLS a été utilisée.22 En bref, des plaques de microtitrage à 96 puits contenant chaque antimicrobien à des dilutions allant de 0,063 mg/L à 64 mg/L ont été préparées à l’avance et conservées à -20°C. Un inoculum d’environ 5 × 105 cfu/mL (déterminé à l’aide de la norme McFarland 5) dans 100 μL a été réalisé à partir de cultures d’une nuit ou de 48 h dans du bouillon Mueller-Hinton et a été ajouté à tous les puits. Les plaques ont été incubées à 37°C pendant 18 à 20 h. En raison de sa nature à croissance lente, il était nécessaire d’incuber les plaques de B. mallei pendant 36 h avant de lire la CMI.

Escherichia coli ATCC 25922 et Staphylococcus aureus ATCC 29213 (NCIMB, Aberdeen, UK) ont été utilisés comme normes de contrôle de la qualité.

Modèles animaux

Toutes les études sur les animaux ont été réalisées conformément au Scientific Procedures Act (Animals) 1986 et aux Codes of Practice for the Housing and Care of Animals used in Scientific Procedures, 1989.

Des souris femelles Porton outbred (élevées en interne) et des hamsters syriens de souche Lakeview (Charles River, Margate, UK) ont été utilisés pour la mélioïdose et la morve expérimentales, respectivement. Les souris ont été maintenues dans des cages de cinq animaux, et les hamsters par paires dans un isolateur à demi-corps à paroi rigide conforme à la norme BS5726. Ils étaient soumis à un cycle lumière-obscurité de 12 h et avaient libre accès à la nourriture et à l’eau. Les souris et les hamsters ont reçu une alimentation commerciale pour rongeurs, les hamsters ont en outre reçu des suppléments de graines de tournesol une fois par semaine.

Dans les études précédentes, les gants en caoutchouc nitrile portés avec la demi-combinaison ont fourni une protection adéquate contre les morsures accidentelles des souris pendant l’élevage et les procédures. Bien que la souche Lakeview du hamster syrien soit réputée pour sa docilité, des gants industriels en Kevlar résistant aux perforations ont été portés par-dessus les gants en caoutchouc nitrile par précaution lors de la manipulation des hamsters infectés.

Administration des antimicrobiens

Les deux antimicrobiens ont été utilisés à une dose de 40 mg/kg de poids corporel, administrés deux fois par jour à 12 h d’intervalle par injection sc dans 0,1 mL chez les souris et dans 0.2 mL chez les hamsters selon l’un des trois régimes suivants : un régime prophylactique, où les antimicrobiens ont été initiés 48 h avant le défi et poursuivis pendant 5 jours après le défi ; un traitement immédiat ou suppressif avec des antimicrobiens administrés immédiatement après le défi et poursuivis pendant 5 jours ; et un régime thérapeutique consistant en une cure de 5 jours d’antimicrobiens commençant 24 h après le défi.

Deux autres groupes de souris stimulées par B. pseudomallei ont reçu le régime prophylactique tel que décrit, sauf que les antibiotiques ont été poursuivis pendant 10 jours après la provocation.

Défi animal et estimation de la virulence

La virulence de chaque pathogène a été déterminée en mesurant la dose létale médiane (DML), définie comme la dose nécessaire pour tuer 50 % d’une petite population d’animaux (25-30) calculée selon la méthode de Reed & Muench23. L’efficacité antimicrobienne a été mesurée en comparant la DLM des animaux traités avec la DLM des témoins non traités.

Des cultures de provocation de B. pseudomallei et B. mallei ont été préparées en récupérant les billes ‘Protect’ appropriées dans un bouillon nutritif et en les incubant pendant 24 h et 48 h, respectivement.

Des souris, par groupes de cinq, ont été stimulées avec 0,1 ml de dilutions sérielles de la suspension de B. pseudomallei par injection ip et observées pendant 35 jours après le défi. Des hamsters, par groupes de quatre, ont été exposés à 0,2 ml de dilutions sérielles de la suspension de B. mallei par voie ip et ont été observés pendant 23 jours après l’exposition. Huit hamsters ayant reçu un traitement immédiat à la doxycycline et huit hamsters ayant reçu le schéma thérapeutique de 24 heures à la doxycycline ont été conservés pendant 5 semaines après la provocation pour des études ultérieures. Dans les deux modèles animaux, les groupes de prophylaxie ont été stimulés à peu près à mi-chemin entre les doses d’antimicrobiens.

Une fois que les signes et les symptômes de chacune des infections ont été caractérisés, des points finaux sans cruauté ont été observés chaque fois que cela était possible. Des autopsies ont été pratiquées dans l’isolateur. Les organes ont été coupés en deux et étalés sur une gélose nutritive qui a été incubée pendant 24 h ou 48 h à 37°C pour B. pseudomallei et B. mallei, respectivement. L’identification des colonies se développant sur les plaques a été confirmée par une réaction en chaîne par polymérase (PCR).

PCR

Des colonies isolées ont été prélevées dans 200 μL d’eau désionisée et bouillies pendant 5 min. L’ADN a été amplifié à l’aide d’amorces oligonucléotidiques complémentaires aux gènes codant pour l’ARNr 16S de B. pseudomallei et B. mallei. L’amplification par PCR a été réalisée en ajoutant 18 μL du mélange suivant : 1 × tampon PCR (Boehringer-Mannheim, Mannheim, Allemagne) ; 0.2 mM de mélange de nucléotides PCR (Boehringer-Mannheim), 180 ng d’amorces oligonucléotidiques 3′ et 5′, 5 % (v/v) de diméthylsulfoxyde (DMSO) et 0,5 U de Taq polymérase (Boehringer-Mannheim) à 2 μL de la suspension de colonies. L’amplification a été réalisée dans un thermocycleur Perkin-Elmer (Perkin-Elmer Cetus, Warrington, UK) dans les conditions suivantes : 30 cycles de 95°C pendant 30 s, 50°C pendant 1 min et 72°C pendant 1 min suivis de 10 min d’extension à 72°C. Les produits PCR ont été analysés par électrophorèse sur gel d’agarose et la bande de produit visualisée par coloration au bromure d’éthidium sur un gel TAE (40 mM Tris-acétate, 1 mM EDTA) à 2%.

Résultats

Sensibilité in vitro

Les deux B. pseudomallei 4845 et B. mallei 23344 étaient sensibles ou modérément sensibles à la ciprofloxacine et à la doxycycline in vitro, B. pseudomallei étant inhibé par 2.0 mg/L de ciprofloxacine et 1,0 mg/L de doxycycline, et B. mallei inhibé par 1,0 mg/L de ciprofloxacine et 0,25 mg/L de doxycycline.

Sensibilité in vivo de B. pseudomallei

Des souris témoins ont été stimulées par voie intrapéritonéale avec une série de dilutions logarithmiques allant de 0,3 cfu à 2,9 × 103 cfu B. pseudomallei, ce qui a entraîné une infection disséminée et rapidement mortelle. Les animaux sont tombés malades dans les 24 à 48 heures qui ont suivi la provocation, ce qui s’est traduit par des symptômes non spécifiques tels que la piloérection. Les animaux ayant reçu les concentrations les plus élevées de B. pseudomallei ont succombé dans les 96 heures qui ont suivi la provocation. L’autopsie a révélé très peu de changements macroscopiques, bien que des bactéries aient pu être isolées du foie, de la rate, des poumons et du sang. Chez les animaux qui ont succombé plus tard, on a constaté une splénomégalie marquée et, parfois, une hépatomégalie. De nombreux petits abcès se sont développés dans la rate et le pancréas, et moins fréquemment dans le foie. Le DML est tombé à 111 cfu dans les 7 jours suivant la provocation, puis a continué à diminuer au cours des 3 semaines suivantes pour atteindre un DML final de 20 cfu (Figures 1 et 2). L’autopsie des animaux survivants n’a révélé aucun changement macroscopique et les organes étaient exempts de B. pseudomallei.

Les souris traitées ont été soumises à une série de dilutions logarithmiques allant de 180 cfu à 1,8 × 107 cfu de B. pseudomallei. Il y avait peu de différence entre l’efficacité des deux antimicrobiens. L’utilisation prophylactique ou immédiate de l’un ou l’autre agent a protégé contre 1 × 107 cfu de bactéries pendant l’administration de l’antimicrobien. Quelques animaux ont rechuté au cours des 5 semaines, les cas les plus spectaculaires se produisant dans le groupe de prophylaxie à la doxycycline, entre 11 et 21 jours après la provocation. À la fin de l’expérience, cependant, les DML étaient nettement plus élevés que ceux des témoins, variant entre 1,4 × 106 cfu et 4,6 × 106 cfu (figures 1 et 2). L’autopsie des survivants a révélé une splénomégalie chez une minorité d’animaux, mais pas au degré observé chez les témoins, et des abcès étaient présents dans certains cas. B. pseudomallei a pu être isolé à partir des organes de certains animaux, y compris ceux qui ne présentaient aucune modification macroscopique apparente.

L’utilisation thérapeutique de l’un ou l’autre des antimicrobiens a retardé l’évolution de l’infection, mais sur 5 semaines, elle n’a apporté qu’une protection minimale, le DML final pour la ciprofloxacine étant de 180 cfu et pour la doxycycline de 640 cfu (Figures 1 et 2).

Sensibilité in vivo de B. mallei

Des hamsters ont été stimulés par voie intrapéritonéale avec une série de dilutions logarithmiques allant de 0,3 cfu à 2,9 × 107 cfu de B. mallei. L’infection a suivi une évolution très rapide caractérisée par des symptômes distinctifs. Dans les 24 à 48 heures, les animaux se sont calmés et sont devenus moins actifs. Le signe initial de la maladie était la production d’un écoulement aqueux des yeux qui devenait purulent. Les signes ultérieurs comprenaient un gonflement des membres et une crépitation palpable de la plèvre. Tous les décès/extrémités humaines sont survenus dans les 7 jours suivant l’infection (figure 3). L’autopsie a révélé peu de changements, la splénomégalie étant la caractéristique dominante, avec parfois des abcès survenant à la fois dans la rate et le pancréas.

Le traitement prophylactique à la ciprofloxacine et le traitement immédiat à la ciprofloxacine ont protégé les animaux contre des défis allant jusqu’à 2,9 × 107 cfu pendant 18 jours, suivis d’une rechute soudaine entraînant une chute des DML à 4,6 × 105 cfu et 7 × 104 cfu, respectivement, à la fin de l’expérience (Figure 3). L’autopsie des animaux morts a révélé une hypertrophie de la rate contenant un ou deux gros abcès. L’autopsie des animaux survivants a généralement révélé une splénomégalie avec un abcès occasionnel à partir duquel B. mallei a pu être isolé.

Lorsque le traitement à la ciprofloxacine a été commencé, huit animaux ayant reçu les défis les plus élevés ont présenté des signes de la maladie. Deux animaux se sont détériorés malgré le traitement, trois animaux sont restés stables sans autre détérioration mais sans amélioration marquée et trois animaux se sont améliorés. À l’exception des deux premiers cas, les animaux ont survécu à des tests de provocation allant jusqu’à 2,9 × 107 cfu pendant 11 jours. Les rechutes sont survenues entre 11 et 18 jours initialement chez les animaux qui avaient présenté une maladie symptomatique. Les rechutes dans les groupes à faible dose sont survenues à partir de 18 jours jusqu’à la fin de l’expérience et le DML final à 23 jours après la provocation était de 1,6 × 103 cfu (figure 3). Les résultats d’autopsie des animaux morts et survivants étaient identiques à ceux des autres régimes.

Tous les régimes de doxycycline ont protégé les hamsters contre des défis allant jusqu’à 2,9 × 107 cfu sans qu’aucune rechute ne soit observée pendant la période expérimentale de 23 jours, y compris l’amélioration de huit hamsters symptomatiques dans le groupe thérapeutique. L’autopsie des survivants a révélé une splénomégalie chez certains animaux, bien qu’aucun B. mallei n’ait été retrouvé.

Des rechutes sont toutefois survenues chez les animaux qui ont été conservés, la maladie réapparaissant chez quatre des huit hamsters ayant reçu un traitement immédiat et chez un des animaux ayant reçu le régime thérapeutique 28-31 jours après le défi. Les autopsies ont révélé de nombreux abcès dans la rate, le foie et le pancréas à partir desquels B. mallei a été isolé.

Discussion

Les deux B. pseudomallei et B. mallei administrés par voie intrapéritonéale ont provoqué une infection rapidement invasive et létale dans leurs modèles animaux respectifs reproduisant l’infection systémique fulminante similaire à celle survenant dans la mélioïdose et la morve humaines. Cependant, la mélioïdose et la morve ont d’autres présentations cliniques, notamment une infection chronique par abcès ou une infection quiescente qui peut prendre plusieurs années avant de devenir symptomatique.2,24,25 Les modèles animaux présentés ici peuvent être manipulés pour reproduire des infections chroniques. Dans le cas de la mélioïdose expérimentale, une infection chronique par abcès chez la souris peut être obtenue chez certains animaux à la suite d’une provocation sous-cutanée ou en utilisant différentes souches murines telles que des consanguins C57B6 ou des consanguins Swiss-Webster (données non publiées). L’infection par B. mallei chez les souris Balb/C, C57B6 et Swiss-Webster outbred entraîne une maladie chronique non mortelle et une maladie chronique mortelle avec un MLD élevé chez les souris Porton outbred (données non publiées). Dans ces expériences, le modèle aigu était intéressant, car il représente sans doute l’infection la plus grave, qui, si elle est prévenue par la ciprofloxacine ou la doxycycline, peut également inhiber l’établissement de la maladie chronique. En outre, de nombreux cas de mélioïdose se présentent comme une maladie aiguë, bien qu’il soit parfois difficile de savoir si l’infection est récente ou si elle représente une « crise » aiguë chez des patients qui peuvent avoir hébergé des infections subcliniques pendant une longue période.

Une caractéristique intéressante de la maladie dans les modèles animaux était l’implication du pancréas comme site d’abcès, particulièrement remarquable dans le modèle du hamster. On a signalé que B. pseudomallei et B. cepacia se lient tous deux à l’insuline26, ce qui peut indiquer une capacité à se lier aux récepteurs de l’insuline, ce qui expliquerait l’implication du pancréas. En outre, le diabète sucré est un facteur prédisposant commun dans les maladies humaines, bien qu’il ne soit pas clair dans certains cas de maladie chronique si B. pseudomallei cause le diabète, ou si le diabète sous-jacent entraîne une maladie symptomatique. La maladie pancréatique dans la mélioïdose humaine, cependant, est rare5 et la signification dans la morve n’est pas connue.

La ciprofloxacine et la doxycycline ont été signalées comme étant inférieures à d’autres antimicrobiens seuls, ou en combinaison, dans le traitement de la mélioïdose chez l’homme et sont associées à des taux de rechute élevés.7,8 Les résultats cliniques ont été reflétés par les résultats observés dans les groupes de traitement de ces études, même lorsque la souche expérimentale était sensible ou modérément sensible à chaque antimicrobien et que les niveaux sériques et tissulaires de l’antimicrobien dépassaient la CMI in vitro. La CMI de la ciprofloxacine contre B. pseudomallei 4845 était typique de 50 % des souches de B. pseudomallei testées dans une étude plus large réalisée dans notre laboratoire19 mais faible par rapport à d’autres études.3,4 La CMI de la doxycycline était la plus élevée mesurée pour toutes les souches de B. pseudomallei testées dans le laboratoire19 mais là encore faible par rapport à d’autres études.5 L’utilisation prophylactique et post-exposition immédiate de ciprofloxacine ou de doxycycline a fourni une bonne protection, bien que l’opportunité d’une prophylaxie ou d’un traitement immédiat dans les cas cliniques soit limitée à des situations telles que les accidents de laboratoire ou le traitement immédiat de précaution après une blessure traumatique dans les zones endémiques. Les expériences ont montré que la « fenêtre d’opportunité », c’est-à-dire le temps qui s’écoule entre l’exposition à l’agent pathogène et la prévention réussie de l’infection par des antimicrobiens, était inférieure à 24 heures après la provocation.

Certaines rechutes ont eu lieu dans les groupes de traitement prophylactique et immédiat, ce qui pourrait être attribué à un certain nombre de facteurs ; principalement, le fait que la durée de l’administration d’antimicrobiens était courte, bien que cliniquement le régime serait prolongé en cas de prophylaxie. La pharmacocinétique comparative de chaque antimicrobien par rapport à la CMI in vitro, et la capacité des bactéries à résider dans des sites intracellulaires privilégiés qui peuvent être inaccessibles aux antimicrobiens seraient également importantes.

Prolonger l’administration de la doxycycline jusqu’à 10 jours après le défi a empêché la rechute (des décès sont encore survenus pendant la période d’administration), mais prolonger l’administration de la ciprofloxacine a augmenté le nombre de rechutes. La pharmacocinétique de la doxycycline était supérieure à celle de la ciprofloxacine en ce qui concerne l’éradication de B. pseudomallei. La doxycycline a atteint une concentration sérique maximale de 3,7 mg/l, et la concentration sérique a dépassé la CMI pendant 24 heures après l’administration. La concentration splénique maximale était de 4,1 mg/kg avec des niveaux dépassant 1 mg/kg pendant 9 h. La concentration sérique maximale de la ciprofloxacine était de 2,9 mg/L avec un dépassement de la CMI pendant seulement 1 h après l’administration, et la concentration splénique maximale était de 10,3 mg/kg restant au-dessus de 2 mg/kg pendant 3 h (données non publiées). Malgré une pharmacocinétique favorable, B. pseudomallei a été retrouvé chez les animaux survivants de tous les groupes, y compris ceux ayant reçu les antimicrobiens pendant 10 jours. Le potentiel de rechute posé par ces bactéries survivantes est difficile à prévoir à partir de ces expériences.

Les similitudes dans la pharmacocinétique des deux antimicrobiens chez les hamsters expliquent les différences entre les efficacités de la doxycycline et de la ciprofloxacine contre B. mallei. La souche utilisée était sensible aux deux antimicrobiens, la CMI de la ciprofloxacine était typique de 50 % des souches testées, bien que la CMI de la doxycycline soit l’une des plus basses. Les concentrations sériques maximales de ciprofloxacine chez le hamster étaient de 2,3 mg/L, la CMI n’étant dépassée que pendant 1 h. Les concentrations spléniques ont atteint un maximum de 20 mg/kg et sont restées supérieures à 1 mg/kg pendant au moins 12 h. Les concentrations sériques de doxycycline ont atteint 2,6 mg/L et sont restées supérieures à 0,25 mg/L pendant au moins 12 h. Les concentrations spléniques ont atteint 8,7 mg/kg et sont restées supérieures à 0,25 mg/kg pendant au moins 12 h (données non publiées). La morve étant une maladie très rare, les mécanismes pathogéniques et les facteurs de virulence de B. mallei n’ont pas été soumis au même degré d’examen que ceux de B. pseudomallei. Les similitudes entre les deux organismes, cependant, sont susceptibles de s’étendre à la pénétration et à la survie intracellulaires, ce qui expliquerait la rechute. Compte tenu de ces similitudes, l’expérience clinique dans le traitement de la mélioïdose sert d’avertissement pour les régimes antimicrobiens potentiels contre la morve, notamment que malgré une pharmacocinétique favorable et une sensibilité apparente, une infection récurrente peut toujours se produire.

Dans ces expériences, les deux antimicrobiens ont démontré une certaine utilité pour la prophylaxie de la mélioïdose, mais étaient impropres à l’utilisation thérapeutique, reflétant les résultats cliniques. Potentiellement, la doxycycline pourrait être utilisée pour la prévention et le traitement de la morve, bien que les problèmes rencontrés dans le traitement de la mélioïdose puissent également s’appliquer à la morve.

Le résumé a été lu pour la première fois au Congrès international sur la mélioïdose qui s’est tenu à Bangkok, en Thaïlande, du 22 au 25 novembre 1998.

.