PARADIGMS OF THE ROLE OF CD40-CD40L INTERACTIONS IN DISEASE

Transplantation. Elinsiirtokirurgia ei olisi saavuttanut viime vuosikymmeninä nähtyä menestystä ilman tehokkaiden immunosuppressiivisten aineiden kehittämistä, jotka minimoivat elinsiirron hylkimisriskin. Monoklonaalista vasta-ainetta (MAb) CD40L:ää vastaan on käytetty immunosuppressiivisena hoitona monissa eläinten elinsiirtomalleissa. Kädellisillä kädellisillä CD40L:n vastaisten MAb-valmisteiden antaminen viivästyttää allograft-siirteen hyljintää, kun taas yhdistelmällä CTLA4Ig:n kanssa, joka on kimeerinen proteiini, joka koostuu solupintamolekyylin CTLA-4:n solunulkoisesta domeenista ja ihmisen IgG1:n Fc-alueesta, joka estää CD28-B7-reittiä, on additiivisia ja synergistisiä vaikutuksia. Tämä yhdistelmähoito ylläpitää munuaisallograftin eloonjäämistä kädellisillä ja lisää ihonsiirteen eloonjäämistä hiirillä (53, 69). Siirtyminen CD40L:n vastaiseen MAb-hoitoon 60 päivän tavanomaisen CsA:lla toteutetun immunosuppression jälkeen oli tehokas hoito apinoiden munuaisallograftimallissa, vaikka CsA:n tiedetään säätelevän CD40L:n ilmentymistä T-soluissa (7). CD40L-geenin ilmentymisen on osoitettu nelinkertaistuvan akuutissa hyljintätilanteessa. Tämä voisi toimia noninvasiivisena menetelmänä allograftin toiminnan seurannassa ja myös biologisen vasteen määrittämisessä klassisille immunosuppressiivisille aineille, kuten CsA:lle ja takrolimuusille, joiden molempien tiedetään estävän CD40L:n induktiota (54). Eläinsiirtomalleissa kalsineuriinin estäjät tukahduttavat CD40L:n ilmentymistä T-soluissa in vitro mutta eivät imukudoksessa, mikä viittaa siihen, että CD40-CD40L-reitti säilyy toiminnassa näiden aineiden hoidon aikana, mikä voi osaltaan vaikuttaa allograftin hylkimiseen kliinisessä tilanteessa (63).

Ateroskleroosi. Nykyinen käsitys ateroskleroosista, joka on länsimaissa yleisin kuolemaan johtava sairaus, on krooninen, rappeuttava, tulehduksellinen sairaus, jossa immuunijärjestelmällä uskotaan olevan tärkeä rooli. CD40 ja CD40L yli-ilmentyvät kokeellisissa ja ihmisen ateroskleroottisissa leesioissa. CD40:n ligaatio ateroomaan liittyvissä solutyypeissä, kuten endoteelisoluissa, sileissä lihassoluissa ja makrofageissa, johtaa ateroskleroosin kehittymiseen vaikuttavien välittäjäaineiden, kuten sytokiinien, kemokiinien, kasvutekijöiden ja metalloproteinaasien, lisääntyneeseen ilmentymiseen. CD40-CD40L-vuorovaikutusten estäminen anti-CD40L MAb:llä hiirillä johtaa hiiren aterooman muodostumisen ja etenemisen vähenemiseen, mutta edistää myös sellaisia muutoksia leesion biologiassa ja rakenteessa, joilla voi olla merkitystä plakin stabiloitumisessa ihmisen taudissa (52).

Myös verihiutaleet ilmentävät CD40L:ää, ja niiden uskotaan myötävaikuttavan merkittävästi tulehdussolujen rekrytoitumiseen vaurioituneeseen endoteeliin in vivo (5). CD40L:ää ilmentäviä aktivoituneita T-soluja sijaitsee ateroskleroottisen verisuonen seinämässä, mikä tukee hypoteesia, jonka mukaan aktivoituneet CD4+ T-solut voivat orkestroida ateroskleroottista prosessia (43).

Taulukossa 1 esitetään lyhyesti muita sairauksia, joissa CD40-CD40L-parilla voi olla merkitystä. Seuraavassa käsitellään lyhyesti tämän vuorovaikutuksen roolia autoimmuunisairauksissa systeeminen lupus erythematosus (SLE), nivelreuma (RA) ja polymyosiitti.

SLE. (i) CD40L:n ilmentyminen ihmisen SLE:ssä (taulukko 2). Desai-Mehta ym. ovat raportoineet, että aktiivista lupusta sairastavien potilaiden perifeerisen veren mononukleaaristen solujen (PBMC) CD40L+ CD4+-solujen prosenttiosuus on 21-kertainen terveisiin henkilöihin verrattuna. Kun PBMC:tä stimuloitiin edelleen anti-CD3 MAb:llä, CD40L+ CD4+ -solujen prosenttiosuus kasvoi viisinkertaiseksi terveillä henkilöillä mutta vain 1,4-kertaiseksi aktiivista SLE:tä sairastavilla potilailla. CD40L+ T-solujen prosenttiosuus pysyi kuitenkin edelleen korkeampana aktiivisen SLE:n ryhmässä. SLE:n remissiossa olevien potilaiden PBMC käyttäytyi samalla tavalla kuin kontrolliryhmässä. Samanlaisia havaintoja tehtiin aktiivista SLE:tä sairastavilta potilailta tuoreeltaan eristettyjen CD8+ T-solujen CD40L-ekspressiosta (22-kertaisesti suurempi ekspressio kuin kontrolliryhmässä). B-solut yliekspressoivat CD40L:ää aktiivista SLE:tä sairastavilla potilailla tasoilla, jotka ovat verrattavissa aktivoituneissa T-soluissa havaittuihin tasoihin. Ihmisen normaalit B-solut ilmentävät CD40L:ää hyvin vähän ja vain silloin, kun niitä manipuloidaan, toisin kuin aktiivisen-SLE:n B-solut, jotka ilmentävät CD40L:ää spontaanisti (12).

Koshy ym. julkaisemassa tutkimuksessa terveiden koehenkilöiden tai tautikontrollipotilaiden aktivoidut PBMC:t osoittivat voimakasta CD40L:n ilmentymistä, jonka ilmentyminen vähitellen laski lähelle lähtötasoarvoja 48 h:ssa, kun taas lupuspotilaiden PBMC:llä esiintyi edelleen merkitsevästi korkeampia CD40L:n pitoisuuksia kyseisenä ajankohtana. Tässä tutkimuksessa ei havaittu ilmeistä korrelaatiota CD40L:n ilmentymisen ja tautiaktiivisuuden välillä (33).

Higuchi ym. vahvistivat nämä tulokset sekä SLE:ssä että hiirten lupuksessa, mikä viittaa siihen, että ektooppisella CD40L:n ilmentymisellä lupuksen B-soluissa voi olla ratkaiseva rooli SLE:n kehittymisessä. Siirtogeeniset lupus-alttiit hiiret, jotka ilmentävät CD40L:ää B-soluissa, tuottavat spontaanisti autovasta-aineita, ja lisäksi puolelle näistä hiiristä kehittyy glomerulonefriitti, johon liittyy immuunikompleksin laskeuma (22). Devi ym. ovat myös vahvistaneet CD40L:n korkean ilmentymisen T- ja B-lupussoluissa. Tarkemmin sanottuna 45 prosenttia SLE-potilaiden T-soluista ilmentää CD40L:ää verrattuna vain 8-18 prosenttiin terveiden henkilöiden tai RA-potilaiden T-soluista. Lisäksi 30 prosentilla tutkituista 48 SLE-potilaasta oli lisääntynyt CD40L:n ilmentyminen myös B-soluissa (13). Edellä mainituista tuloksista poiketen on kuitenkin yksi raportti, jossa ei havaittu muutoksia CD40L:n ilmentymisessä lupuslymfosyyteissä. Sen sijaan nämä kirjoittajat raportoivat, että SLE:n B-soluissa ilmentyy runsaasti CD86:ta, joka on myös tärkeä kostimulatorinen molekyyli (3). Toisessa tutkimuksessa on raportoitu, että aktiivista SLE:tä sairastavien potilaiden monosyytit ilmentävät CD40L:ää poikkeavasti. Tutkimuksessa tutkittiin 23 aktiivista SLE:tä sairastavaa potilasta ja verrattiin niitä 16 terveeseen henkilöön. Tulokset osoittivat, että SLE-potilaiden perifeeristen CD40L:ää ilmentävien monosyyttien esiintymistiheys oli seitsenkertainen terveisiin verrattuna. CD40L:n ilmentyminen varmistettiin sekä mRNA- että proteiinitasolla, ja se korreloi merkitsevästi tautiaktiivisuuden kanssa (28).

CD40L pilkkoutuu aktivoituneiden T-solujen solupinnalta matriksin metalloproteinaasin toimesta, jolloin vapautuu noin 18-20 kDa:n kokoinen sCD40L-molekyyli, joka muodostaa homotrimerejä. Raportissa, jossa tutkittiin sCD40L:n toiminnallista roolia, todettiin, että sCD40L voi indusoida B-solujen aktivoitumista ja erilaistumista. Plasman sCD40L-pitoisuudet olivat merkittävästi korkeammat aktiivista SLE:tä sairastavilla potilailla kuin terveillä luovuttajilla. Nämä tasot korreloivat SLEDAI:lla arvioituun taudin aktiivisuuteen ja verenkierrossa oleviin kaksisäikeisen DNA:n (dsDNA) vastaisten autovasta-aineiden tittereihin. On oletettu, että aktiivista SLE:tä sairastavilla potilailla todetuilla korkeilla sCD40L-pitoisuuksilla voi olla patogeeninen rooli vaskuliitissa ja aktiivisessa lupuksessa esiintyvässä nefriitissä. Kirjoittajat ehdottivat, että sCD40L-tasot voisivat tulevaisuudessa toimia SLE-taudin puhkeamisen ennakoivana merkkiaineena (27). Vakkalanka ym. osoittivat myös huomattavasti korkeampia sCD40L:n keskimääräisiä pitoisuuksia lupuspotilailla kuin tautikontrolleilla ja terveillä henkilöillä. Tarkemmin sanottuna tutkittiin 66 SLE-potilasta, joita verrattiin 30 tautikontrollipotilaaseen ja 23 terveeseen henkilöön. Terveillä koehenkilöillä sCD40L:n pitoisuus oli lähes määrittelemätön, kun taas 38:lla SLE-potilaalla sCD40L-pitoisuus oli yli 2 ng/ml (keskipitoisuus 2,61 ± 2,15 ng/ml) ja vain 7:llä tautikontrollipotilaalla sCD40L-pitoisuus oli yli 1 ng/ml. Potilaat jaettiin kolmeen ryhmään, vakavaan, keskivaikeaan ja lievään, kliinisten oireiden mukaan. Vaikeaa SLE:tä sairastavien potilaiden sCD40L-keskiarvopitoisuus oli 3,93 ± 2,86 ng/ml, keskivaikeaa SLE:tä sairastavien potilaiden sCD40L-keskiarvopitoisuus oli 2,81 ± 1,57 ng/ml ja lievää tautia sairastavien potilaiden sCD40L-keskiarvopitoisuus oli 1,52 ± 1 ng/ml.06 ng/ml, mikä osoittaa korrelaatiota sCD40L-tason ja taudin aktiivisuuden välillä (62).

Ja vaikka CD40L:n induktio aktivoituneissa normaaleissa T-soluissa estyy CsA:n läsnä ollessa, on mielenkiintoista, että tämä vaikutus ei koske SLE:n T-soluja. Tutkimuksessa, joka koski CD40L:n ilmentymistä ihmisen lupuksessa, todettiin, että CsA ei pystynyt estämään pitkittynyttä ja voimistunutta CD40L:n ilmentymistä, joka havaittiin in vitro anti-CD3 MAb:llä aktivoiduissa lupuksen T-soluissa. Resistenssi CsA:lle oli taudin aktiivisuudesta riippumaton. Myös verenkierrossa olevilla lupusmonosyyteillä on huomattava resistenssi CsA:n CD40L-ekspressiota estäville vaikutuksille. Nämä tulokset viittaavat siihen, että CD40L:n induktiota SLE:n T-soluissa saattaa säädellä kalsium/kalsiinureiinista riippumaton reitti (29).

Ei ole selvää, miksi CD40L:n ilmentyminen on suurempaa SLE:tä sairastavilla potilailla ja onko tällä yliekspressiolla patogeneettisiä vaikutuksia. On ehdotettu, että SLE:n T-lymfosyytit, kun ne aktivoituvat TCR-kytkennällä, suosivat NFAT-dominoivaa profiilia tasapainoisen NFAT-AP-1-transkriptiotekijäprofiilin sijasta. Tämä solunsisäisten välittäjäaineiden paneeli edistää tiettyjen geenien, kuten CD40L-geenin, transkriptiota ja mRNA-stabiilisuutta. CD40L:n varhainen ilmentyminen SLE:n T-soluissa edellyttää CsA-herkkää NFAT-reittiä, mutta pitkittynyt ilmentyminen on riippuvaisempi tietystä MAP-kinaasista eli solunulkoisen signaalin säätelemästä kinaasista. Lisääntynyt ja jatkuva solunulkoisen signaalin säätelemän kinaasin aktiivisuus lupuksen T-soluissa saattaa vaikuttaa CD40L:n yliekspressioon AP-1-transkriptiotekijän aktivoitumisen kautta ja mahdollisesti stabiloimalla CD40L:n mRNA:ta (10, 68). SLE-potilaiden kiertävissä T- ja B-soluissa sytoplasman Ca2+ -virtaukset ovat supranormaaleja, ja on ehdotettu, että tämä poikkeavuus voi olla molekulaarinen tausta epänormaalille CD40L-ekspressiolle lupuksessa (38, 40, 64). On myös näyttöä siitä, että TCR ζ -ketjun puutos, joka on kuvattu SLE-potilailla, saattaa olla osittain vastuussa edellä mainitusta supranormaalista Ca2+ -vasteesta (39, 61). Tätä korrelaatiota on vahvistanut äskettäinen raportti, jonka mukaan TCR ζ-ketjun puutteen transfektiivinen korjaaminen lupuksen T-soluissa johtaa sytoplasmisen Ca2+ -virran normalisoitumiseen (48).

(ii) Anti-CD40L MAb:n käyttö lupusmalleissa ja SLE:ssä. CD40/CD40L:n moninaiset tehtävät immuunivasteessa ovat tehneet siitä houkuttelevan kohteen terapeuttisille interventioille autoimmuunisairauksissa. CD40L:n vastaavia MAboja testattiin aluksi hiirten lupusmalleissa. Uusiseelantilaisen mustan × uusiseelantilaisen valkoisen (NZB × NZW) F1-hiirten jatkuva CD40L:n vastainen MAb-infuusio viivästytti taudin puhkeamista keskimäärin neljällä kuukaudella, IgG anti-dsDNA-autovasta-ainepitoisuudet pienenivät, aktivoituneen muistifenotyypin omaavien T-solujen kertyminen viivästyi, B-solujen määrä pernassa väheni ja Ig-luokkien vaihtuminen ja somaattiset mutaatiot estyivät. IgG anti-dsDNA-vasta-aineiden seerumipitoisuudet olivat 4-10-kertaisesti pienemmät kuin hoitamattomilla ikäsekoitetuilla kontrolleilla. Hoidon lopettamisen jälkeen hoidettujen hiirten T-solujen fenotyyppi ei enää eronnut kontrollien fenotyypistä, ja B-solut saavuttivat täysin aktivoituneen fenotyypin, jolloin IgG anti-dsDNA-titterit nousivat ja kehittyi proteinuria ja etenevä munuaissairaus (65).

Toisessa tutkimuksessa käytettiin yhdistelmähoitoa, jossa käytettiin anti-CD40L-vasta-ainetta ja CTLA4Ig:tä. Lyhytaikainen yhdistelmähoito NZB×NZW F1-prenepriittisillä hiirillä johti munuaisten toimintahäiriön viivästyneeseen alkamiseen noin 6 kuukauden ajan. Proteinurian puhkeamisen jälkeen toistuva hoito sai aikaan remissiota aiemmin hoidetuissa hiirissä mutta ei aiemmin hoitamattomissa hiirissä. IgG anti-dsDNA-autovasta-aineiden määrä väheni, ja hiirten pernassa oli selvästi vähemmän B-soluja jopa 16-20 viikkoa infuusion jälkeen. On esitetty, että CTLA4Ig- ja anti-CD40L-MAb-hoito voivat synergisesti estää antiapoptoottisia signaaleja ja siten helpottaa B-solujen apoptoosia varhaisen B-soluaktivaation aikana. Tämä hoito ei aiheuttanut pitkäaikaista globaalia immunosuppressiota (66).

Kokeellisissa eläinkokeissa saatuja lupaavia tuloksia ei ole vahvistettu SLE:ssä. Ihmisen lupuksessa syklofosfamidi on edelleen ”kultainen standardi ” suurten elinvaurioiden hoidossa. Syklofosfamidi on alkyloiva aine, joka aiheuttaa epäspesifistä immuunivasteen estoa ja kliinisesti merkittävää immunosuppressiota. Sillä on merkittäviä sivuvaikutuksia, kuten virtsarakon syöpä ja sukurauhasen vajaatoiminta, minkä vuoksi uusien terapeuttisten menetelmien kehittäminen on välttämätöntä. Syklofosfamidin antaminen on ollut vakiintunut hoitomuoto lupusnefriitissä, joka on yleinen ja pelätty SLE:n komplikaatio ja yksi johtavista sairastuvuuden ja kuolleisuuden syistä.

Kaksi tutkimusta anti-CD40L MAb:n antamisesta ihmisen lupuksessa on julkaistu. Ensimmäiseen, vaiheen 2 kaksoissokkoutettuun, lumelääkekontrolloituun monikeskustutkimukseen osallistui 85 potilasta, joilla oli lievä tai kohtalaisen aktiivinen SLE, ja he saivat kuusi IDEC-1-injektiota (anti-CD40L MAb) tai lumelääkettä 16 viikon ajan. Tehoa arvioitiin viikolla 20 ensisijaisesti SLEDAI:n avulla. Tulokset osoittivat, että hoito IDEC-1:llä oli turvallista ja hyvin siedettyä, mutta ei osoittanut tehoa lumelääkkeeseen verrattuna (19, 26).

Toisessa tutkimuksessa arvioitiin potilaita, joilla oli biopsialla osoitettu proliferatiivinen lupusnefriitti, käyttämällä BG9588:a (anti-CD40L MAb). Tutkimukseen osallistui 28 potilasta, joilla oli aktiivinen proliferatiivinen lupusnefriitti, ja he saivat 20 mg BG9588:aa painokiloa kohti kahden viikon välein kolmen ensimmäisen annoksen ajan ja kuukausittain neljän lisäannoksen ajan. Tulokset osoittivat, että proteinuria (jos sitä esiintyi) väheni 50 % ilman munuaisten toiminnan heikkenemistä, hematuria hävisi ja seerumin C3-pitoisuus nousi. Anti-dsDNA-autovasta-ainetitterit pienenivät hoidon jälkeen, ja keskimääräiset vähennykset olivat 38,8, 50,1 ja 25,3 % vastaavasti 1, 2 ja 3 kuukauden kuluttua hoidosta (4). Tämä tutkimus lopetettiin ennenaikaisesti tromboembolisten komplikaatioiden vuoksi. Tarkemmin sanottuna raportoitiin kaksi sydäninfarktitapausta. Tromboottiset vaikutukset, jotka vaikeuttivat tätä hoitoohjelmaa, herättivät tärkeitä kysymyksiä tulevista ihmisillä tehtävistä tutkimuksista. On huomattava, että yhdelläkään tromboottisen tapahtuman saaneista potilaista ei ollut osoitettavissa olevia fosfolipidivasta-aineita. CD40-CD40L-vuorovaikutuksen rooli näissä tromboottisissa komplikaatioissa on edelleen epäselvä ja hypoteettinen.

Tutkimus viidestä lupusnefriittipotilaasta, jotka saivat anti-CD40L-hoitoa, osoitti, että lyhyt hoitojakso johtaa IgG-vasta-aineita tuottavien IgG-vasta-aineita tuottavien B-solujen määrän vähenemiseen. Nämä muutokset jatkuivat useita kuukausia hoidon lopettamisen jälkeen (25). Samankaltaisessa tutkimuksessa, jossa tutkittiin neljää aktiivista lupusnefriittiä sairastavaa potilasta, jotka saivat anti-CD40L-hoitoa (BG9588), osoitettiin, että CD38-, CD5- ja CD27-arvoja ilmentävät B-solut, joita pidetään B-solujen erilaistumisen merkkiaineina, katosivat periferiasta anti-CD40L-hoidon aikana. Näihin muutoksiin liittyi anti-dsDNA-vasta-ainepitoisuuksien, proteinurian ja SLE-taudin aktiivisuusindeksin väheneminen (20).

RA. (i) CD40L:n ilmentyminen RA:ssa (taulukko 2). RA on yleinen autoimmuunisysteeminen reumasairaus, jolle on ominaista krooninen kudostuhoprosessi, joka johtuu mahdollisesta jatkuvasta antigeenivetoisesta immuunivasteesta. Koska aktivoituneilla T-soluilla uskotaan olevan keskeinen rooli, ei ole yllättävää, että CD40-CD40L-vuorovaikutuksia on tutkittu RA:n yhteydessä.

Berner ym. tutkivat CD40L:n ilmentymistä RA-potilaiden T-soluissa. Tutkimuksessa tutkittiin 62 RA-potilasta ja 20 tervettä koehenkilöä. CD40L ilmentyi voimakkaasti >10 %:ssa T-soluista 29 %:lla RA-potilaista, mutta 0 %:ssa terveiden kontrollien T-soluista. RA-potilailla, joilla oli >10 % CD4+ CD40L+ T-soluja, oli aktiivisempi tauti. Kahdeksallakymmenelläkolmella prosentilla tähän ryhmään kuuluvista potilaista oli kohonnut C-reaktiivisen proteiinin pitoisuus, 89 prosenttia oli reumatekijäpositiivisia, eikä yksikään heistä täyttänyt American College of Rheumatologyn kriteerejä täydelliselle kliiniselle remissiolle, mikä viittaa vahvaan korrelaatioon taudin aktiivisuuden ja CD40L:n ilmentymisen välillä (2). Korkeat CD40L-ekspressiotasot voivat heijastaa lymfosyyttien lisääntynyttä ja pitkittynyttä aktivaatiota, joka johtaa lisääntyneeseen ja pitkittyneeseen tulehdusaktiivisuuteen. Toiminnallisen CD40L:n korkean tason ilmentymisen RA-potilaiden T-soluissa osoittivat myös MacDonald ym. (42).

Toisessa tutkimuksessa käsiteltiin CD40-CD40L-signaloinnin merkitystä RF-tuotannossa. Terveessä immuunijärjestelmässä korkea-affiniteettiset autoreaktiiviset B-solut on poistettu. Terveillä henkilöillä imusolmukkeissa on matala-affiniteettisia RF:ää tuottavia B-soluja, mutta korkeaaffiniteettista RF:ää ei ole havaittavissa. RA:ssa korkea-affiniteettiset RF:tä tuottavat B-solut kerääntyvät tulehtuneeseen synoviaan. Tämän tutkimuksen tulokset osoittivat, että vuorovaikutus aktivoituneiden T-solujen CD40L:n ja RF:ää tuottavien B-solujen CD40:n välillä on ratkaisevan tärkeää paitsi näiden autoreaktiivisten B-solujen selviytymisen myös RF-synteesin kannalta. Kaksi signaalia, jotka ovat välttämättömiä ja riittäviä korkean affiniteetin RF-synteesin indusoimiseksi in vivo, olivat IgG ja CD40-CD40L-vuorovaikutus. Jos CD40-CD40L-vuorovaikutus puuttui, RF B-solut hävisivät (35).

Cho ym. tutkivat CD40-CD40L-vuorovaikutuksen merkitystä verisuonten endoteelin kasvutekijän (VEGF) tuotannossa. RA:ssa tulehtuneella synovialla on kasvaimen kaltaisia piirteitä. Reumapannuksen säilyminen ja laajeneminen riippuvat neovaskularisaatiosta, sillä mononukleaaristen solujen laaja migraatio synoviaan ja pannuksen liikakasvu riippuvat runsaan verisuonipohjan olemassaolosta. VEGF, hepariinia sitova dimeerinen glykoproteiini, on keskeinen angiogeneesin välittäjä, joka indusoi endoteelisolujen proliferaatiota ja kapillaarien läpäisevyyttä. On osoitettu, että aktivoituneiden T-solujen CD40L:n aktivoima CD40-ligaatio synoviaalisiin fibroblasteihin johti VEGF:n lisääntyneeseen tuotantoon, joka lisääntyy entisestään IL-1:n, TNF-α:n ja transformoivan kasvutekijän β läsnä ollessa (8). RA:n synoviosyyttien CD40:n ligaatio aktivoitujen T-solujen CD40L:llä synovian sisällä lisää merkittävästi TNF-α:n tuotantoa annosriippuvaisesti (21). TNF-α on keskeinen sytokiini RA:n patogeneesissä. TNF-α:n lisäksi myös IL-10:n tuotanto lisääntyy CD40-CD40L-vuorovaikutusten kautta (15). RA-potilaiden synoviaalinesteen T-solut ilmentävät runsaasti CD40L:ää verrattuna terveiden luovuttajien perifeerisen veren T-soluihin, ja in vitro -aktivoinnin jälkeen ne ilmentävät CD40L:ää pitkäkestoisesti ja korkealla tasolla. Tulokset osoittivat, että 8,71 prosenttia RA-potilaiden synoviaalinesteen T-soluista oli CD40L+, kun kontrolliryhmässä vastaava osuus oli 1,74 prosenttia (41). CD40-CD40L-vuorovaikutuksen mahdollinen merkitys RA:n patogeneesissä johti pyrkimyksiin tämän akselin farmakologiseen manipulointiin terapeuttisena lähestymistapana RA:ta sairastavilla potilailla.

(ii) Anti-CD40L MAb:n käyttö RA:n eläinmalleissa. Hoito anti-CD40L MAb:llä hillitsee kollageenin aiheuttaman niveltulehduksen kehittymistä, joka on RA:n eläinmalli. Tarkemmin sanottuna niveltulehduksen kehittyminen estyi, ja tulehdussolujen infiltraatio subsynoviaaliseen kudokseen ja ruston eroosio vähenivät (14). K/B×N-siirtogeenisillä hiirillä, Ig-välitteisen niveltulehduksen mallissa, anti-CD40L MAb -hoito vähensi merkittävästi niveltulehduksen kehittymistä, kun sitä annettiin viikkoa ennen kliinisesti ilmeisen taudin puhkeamista, mutta hoito ei tuottanut tulosta, kun sitä annettiin vakiintuneessa taudissa (36).

Dermatomyosiitti/polyymyosiitti. Eräässä tutkimuksessa, jossa analysoitiin 9 potilasta, joilla oli polymyosiitti ja dermatomyosiitti, havaittiin, että lihakseen tunkeutuvat T-solut olivat CD40L+ kaikissa 9 tapauksessa, mikä viittaa CD40-CD40L-vuorovaikutusten mahdolliseen rooliin edellä mainituissa kliinisissä kokonaisuuksissa (58).