Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

  • Mikä on ELISA-testi?
  • Mihin testiä käytetään?
  • Miten ELISA-testi toimii?
  • Valmistautuminen testiin
  • Mitä testi sisältää?
  • Tulokset ja niiden merkitys
  • Mikä voi vaikuttaa testiin?

Mikä on ELISA-testi?

ELISA-testi eli entsyymi-immunosorbenttimääritys on menetelmä, jota käytetään laboratoriossa avuksi monien eri sairauksien diagnosointiin. Testi tehdään verestä tai virtsasta, ja sitä käytetään tietyn proteiinin tai aineen, kuten tartunnanaiheuttajien, allergeenien, hormonien tai lääkkeiden, määrän mittaamiseen näissä ruumiinnesteissä.

Testi perustuu immuunijärjestelmän antigeeneiksi ja vasta-aineiksi kutsuttujen komponenttien väliseen vuorovaikutukseen. Vasta-aineet ovat elimistön tuottamia proteiineja, jotka tunnistavat ja neutralisoivat vieraita aineita, kuten viruksia ja bakteereja. Aineita, joita vastaan vasta-aineita tuotetaan, kutsutaan antigeeneiksi, koska ne herättävät immuunivasteen.

Mihin testiä käytetään?

ELISA-testejä käytetään laboratoriossa lukuisissa erityyppisissä testeissä, jotka voivat auttaa monien eri sairauksien diagnosoinnissa.

Testiä pyydetään yleisimmin, jos epäillään, että olet altistunut viruksille, kuten HIV:lle ja hepatiitti B:lle tai C:lle, tai bakteereille ja loisinfektioille, kuten toksoplasmoosille, Lymen taudille ja Helicobacter pylori -bakteerille. Sillä voidaan myös mitata vasta-ainepitoisuuksia, jotta voidaan selvittää, onko sinut rokotettu tiettyjä tauteja, kuten sikotautia ja vihurirokkoa vastaan.

Muita ELISA-testin käyttötarkoituksia ovat:

  • Tietyjen hormonipitoisuuksien, kuten HCG:n mittaaminen raskaustestissä, kilpirauhashormonit
  • Pöly- ja ruoka-aineallergioiden havaitseminen
  • Lainvastaisten huumausaineiden, kuten kokaiinin ja metamfetamiinin, havaitseminen.
  • Vasta-aineiden mittaaminen, joita tuotetaan autoimmuunisairauksissa, kuten lupuksessa ja nivelreumassa.

Joitakin testipaketteja on saatavilla myös suuren yleisön käyttöön, esimerkiksi; kotiraskaustesti perustuu ELISA-periaatteeseen, ja se havaitsee ihmisen koriongonadotropiiniksi (hCG) kutsutun hormonin läsnäolon, jota erittyy raskaana olevan naisen virtsaan.

Miten ELISA-testi toimii?

ELISA-testistä on useita muunnelmia riippuen siitä, havaitaanko vasta-aineita vai antigeenejä.

Jos havaitaan vasta-aineita esimerkiksi HIV:tä vastaan, osa HIV-viruksesta kiinnitetään kiinteään pintaan, kuten putkeen tai levyyn. Tämä toimii antigeeninä. Seerumi lisätään sitten putkeen, ja jos se sisältää vasta-aineita antigeenille, se sitoutuu siihen. Tämän jälkeen lisätään toinen vasta-aine, joka tunnistaa HIV-vasta-aineet, ja se sitoo kaikki sitoutuneet vasta-aineet. Tämä toinen vasta-aine liittyy entsyymiksi kutsuttuun kemikaaliin (entsyymi nopeuttaa kemiallista reaktiota), ja viimeisessä vaiheessa lisätään ainetta, joka reagoi vasta-aineen entsyymin kanssa ja tuottaa värillisen tuotteen. Jos testi on positiivinen, syntyy värireaktio. Jos sinulla ei ole vasta-aineita kyseistä tiettyä antigeenia vastaan, reaktiota ei tapahdu eikä värimuutosta näy.

Miten testiin valmistaudutaan

Valmisteluja ei tarvita.

Mitä testi sisältää?

Testi edellyttää yleensä veren ottamista laskimosta tai virtsanäytteen ottamista.

Tulokset ja niiden merkitys

Useimmat ELISA-testit antavat joko positiivisen tai negatiivisen tuloksen, joko elimistössäsi on vasta-ainetta tai ei. Jotkin muut ovat puolikvantitatiivisia ja antavat arvon, kuten hormonipitoisuuksia mitattaessa.

Mikä voi vaikuttaa testiin?

Väärän positiivisen tai väärän negatiivisen tuloksen esiintyminen on ELISA-testin haittapuoli, joten monissa tapauksissa sitä seurataan varmistavalla testillä. Esimerkiksi HIV:n ja borrelioosin ELISA-testi voi usein antaa väärän positiivisen tuloksen, joten kaikille positiivisille näytteille tehdään myös toisenlainen testi tämän varmistamiseksi. Vääriä positiivisia tuloksia voi esiintyä, jos sinulla on jokin perussairaus, kuten lupus tai reumasairaus.

Negatiivinen tulos ei aina tarkoita, ettei infektiota ole, sillä jotkin vasta-aineet eivät muodostu heti infektion jälkeen. HIV:n vasta-aineet näkyvät veressä vasta 6 viikon kuluttua virukselle altistumisesta, joten on suositeltavaa, että jos epäilet, että olet altistunut, testi toistetaan kolmen kuukauden kuluttua.

  1. Branson BM. HIV-infektion diagnosoinnin nykytilanne. 2007. Clin. Infect. Diseases. 45: Supplement 4:S221-5
  2. Prescott LM, Harley JP ja Klein DA. Microbiology. Wm. C. Brown publishers. Dubuque, IA. 1996
  3. Staffan P, Perlmann H, Bermenn P. 2005. Biotieteiden tietosanakirja. Enzyme-linked immunosorbent assay. Julkaistu verkossa 27.1.2006
    http://mrw.interscience.wiley.com.dbgw.lis.curtin.edu.au

.