Entsyymiyksikkö tai entsyymin kansainvälinen yksikkö (symboli U, joskus myös IU) on entsyymin katalyyttisen aktiivisuuden yksikkö.

1 U (μmol/min) määritellään entsyymin määräksi, joka katalysoi yhden mikromoolin substraatin muuntumisen minuutissa määritysmenetelmän määritellyissä olosuhteissa.

Määritetyt olosuhteet ovat yleensä optimaaliset olosuhteet, joihin kuuluvat muun muassa lämpötila, pH ja substraattikonsentraatio, jotka tuottavat maksimaalisen substraatin muuntumisnopeuden kyseiselle entsyymille. Joissakin määritysmenetelmissä käytetään yleensä 25 °C:n lämpötilaa.

Ensyymiyksikkö hyväksyttiin Kansainvälisessä biokemian liitossa vuonna 1964. Koska minuutti ei ole SI:n ajan perusyksikkö, entsyymiyksikköä ei suositella, vaan suositaan katalia, jota painojen ja mittojen yleiskonferenssi suositteli vuonna 1978 ja joka hyväksyttiin virallisesti vuonna 1999.

Yksi katal on entsyymiaktiivisuus, joka muuntaa yhden moolin substraattia sekunnissa määritellyissä määritysolosuhteissa, joten

1 U = 1 μmol/min = 1/60 μmol/s ≈ 16,67 nmol/s; 16,67 nkat = 16,67 nmol/s; Näin ollen 1 U = 16,67 nkat

Ensiymiyksikön käsitettä ei pidä sekoittaa kansainväliseen yksikköön (International Unit, IU). Vaikka onkin totta, että 1 U = 1 IU (koska monien entsyymien kohdalla olemassa oleva U hyväksyttiin myöhemmin IU:ksi), kansainvälisiä yksiköitä voidaan määritellä monien muidenkin aineiden biologiselle aktiivisuudelle kuin entsyymien (esimerkiksi vitamiinien ja hormonien)

.