Volné ribozomy ve fyziologicky nedělících se buňkách. Lidské periferní lymfocyty

Ribosomy fyziologicky nedělících se lidských lymfocytů periferní krve byly studovány pomocí měření ultrafialové absorbance cytoplazmatických extraktů podrobených ultracentrifugaci v sacharózových gradientech při vysoké a nízké iontové síle. Nejméně 70 % všech cytoplazmatických ribozomů tvořily volné ribozomy, které sedimentovaly při 80 S v nízkém obsahu soli a disociovaly na 40 S a 60 S podjednotky ve vysokém obsahu soli. Tyto částice se nepodílely na syntéze proteinů. Zbývající ribosomy byly rovnoměrně rozděleny mezi nativní podjednotky, aktivní monosomy a větší polysomy. Bylo prokázáno, že volné ribosomy existují v intaktní buňce jako částice 80 S, a studie značení ukázaly, že se volně nevracejí do poolu složek syntetizujících proteiny. Nové ribosomy se objevily nejprve jako nativní podjednotky a v polysomech. Po prodlevě 15 až 20 min se částice začaly dostávat do volného bazénu ribozomů. Volné ribozomy tedy vznikají v klidové buňce jednosměrným tokem, který průběžně odstraňuje částice z poolu syntetizujícího proteiny a sekvestruje je jako akumulaci neaktivních 80 S částic. Přechod od nativních podjednotek k volným ribosomům je doprovázen funkčními změnami v asociačním chování podjednotek a změnou sedimentačního chování podjednotek. Tyto změny mohou být způsobeny absencí proteinu nebo proteinů ve volných ribozomech, které jsou nutné k umožnění účinné disociace podjednotek před zahájením translace. Nedostatek tohoto disociačního faktoru může být zodpovědný za neustálou tvorbu volných ribosomů v klidových buňkách. Naše údaje rovněž naznačují omezení rychlosti iniciace syntézy proteinů, které může být důsledkem nedostatku iniciačního faktoru.