Abstrakt

Rheumatoidní artritida (RA) je vyčerpávající autoimunitní onemocnění s celosvětovou prevalencí. Onemocnění je charakterizováno synoviálním zánětem vedoucím k poškození chrupavky a kostí. Většina konvenčních léků používaných k léčbě RA má závažné nežádoucí účinky a je poměrně drahá. V průběhu let se stále větší část pacientů s RA a dalšími poruchami imunity uchyluje ke komplementární a alternativní medicíně (KAM), aby řešila své zdravotní potřeby. Přírodní rostlinné produkty představují jednu z nejoblíbenějších CAM pro léčbu zánětlivých a imunitních poruch. Tyto rostlinné CAM patří do různých tradičních medicínských systémů, včetně tradiční čínské medicíny, kampo a ájurvédské medicíny. V tomto článku jsme nastínili hlavní imunologické dráhy zapojené do indukce a regulace autoimunitní artritidy a popsali různé rostlinné CAM, které mohou tyto imunitní dráhy účinně modulovat. Většina informací o mechanismech účinku bylinných produktů v experimentálních modelech RA je relevantní i pro pacienty s artritidou. Studium imunologických drah ve spojení s novým uplatněním genomiky a proteomiky ve výzkumu CAM pravděpodobně přinese nové poznatky o mechanismech účinku různých CAM modalit.

1. Bylinné CAM pro léčbu zánětlivé autoimunitní artritidy

Konvenční (alopatické) protizánětlivé léky jsou základem léčby různých poruch imunity, včetně revmatoidní artritidy (RA) . Významnou skupinu těchto léků představují nesteroidní protizánětlivé léky (NSAID) a biologika (např. protilátky proti tumor nekrotizujícímu faktoru (TNF)-α a návnada na receptor TNF-α). Užívání těchto léků je však spojeno se závažnými nežádoucími účinky, včetně gastrointestinálního krvácení a kardiovaskulárních komplikací . Vzhledem k nežádoucím účinkům a vysoké ceně konvenčně používaných protizánětlivých léků pacienti s artritidou stále častěji využívají způsoby léčby pomocí komplementární a alternativní medicíny (CAM) . Více než 36 % Američanů ročně používá produkty CAM na různé poruchy a tento trend je na vzestupu . Tradiční čínská medicína, ájurvédská medicína, kampo a homeopatie patří mezi hlavní přispěvatele přírodních produktů užívaných populací pacientů. Navzdory rostoucímu užívání a popularitě produktů CAM v západním světě , je však jedním z hlavních omezení jejich užívání nedostatečná informovanost o mechanismech jejich účinku a objektivita při hodnocení účinnosti . To je také jeden z hlavních důvodů skepse vůči CAM v myslích laické i odborné veřejnosti . Je tedy potřeba pokračovat ve studiích mechanistických aspektů působení produktů CAM .

Rozmanitá skupina onemocnění je charakterizována zánětem, který může být vyvolán nejen cizorodými mikrobiálními antigeny, ale také autoantigeny. Reakce na autoantigeny vede k autoimunitnímu zánětu. Proto jsou stejně jako infekční onemocnění i autoimunitní onemocnění (např. roztroušená skleróza (RS), diabetes mellitus 1. typu (T1D), RA a ateroskleróza) spojena se zánětem. Vzhledem k tomu, že autoimunitní onemocnění jsou důsledkem dysregulace imunitního systému , je nezbytné prozkoumat a odhalit imunologický základ terapeutické aktivity produktů CAM proti autoimunitním poruchám i dalším stavům zahrnujícím zánět. Tento článek je zaměřen na imunomodulaci autoimunitní artritidy rostlinnými produkty CAM. Podrobně jsme zde popsali adjuvantní artritidu (AA) (obr. 1) jako prototypický experimentální model RA. Z koncepčního hlediska jsou hlavní imunitní efektorové dráhy u AA obecně reprezentativní pro různé další zvířecí modely artritidy, například kolagenem indukovanou artritidu (CIA), streptokokovou buněčnou stěnou indukovanou artritidu (SCWIA) a proteoglykanem indukovanou artritidu. Zpracovali jsme specifické imunitní dráhy u artritidy, které jsou modulovány různými rostlinnými přípravky pocházejícími z rostlin původem z různých oblastí světa (tabulka 1 a obrázky 2 a 3). Tyto imunitní mechanismy zahrnují buněčnou a humorální odpověď, cytokinovou odpověď/rovnováhu a buněčnou migraci do cílového orgánu.

(a)

(b)

.

(a)
(b)

Obrázek 1

Experimentálně-indukovaná adjuvantní artritida (AA) u potkana Lewisova. (a) Artritické tlapky a (b) průběh onemocnění. AA je vyvolána subkutánní imunizací tepelně usmrceným M. tuberculosis H37Ra (1 mg/rat) . Fáze AA jsou následující: inkubace, nástup, vrchol a zotavení. Artritické skóre vyjadřuje závažnost artritidy . Každá tlapka je hodnocena na stupnici od 0 do 4 a celkové skóre pro potkana se získá sečtením skóre všech 4 tlapek daného potkana .

Obrázek 2

Schematický přehled imunologických efektorových mechanismů, které zprostředkovávají antiartritickou aktivitu různých bylinných modalit CAM. Rostlinné produkty ovlivňují počet a/nebo aktivitu specifických imunitních mediátorů (např. T buněk, protilátek, cytokinů a chemokinů), které následně řídí 3 hlavní imunitní dráhy vedoucí k patologickému poškození pozorovanému u artritidy . Tyto dráhy zahrnují buněčnou a humorální imunitní odpověď, cytokinovou odpověď/rovnováhu a buněčnou migraci. Čistým účinkem těchto imunologických změn vyvolaných bylinnou léčbou je potlačení zánětlivých a souvisejících artritických procesů . Názvy a zeměpisný původ konkrétních rostlinných produktů, které tyto změny vyvolávají, jsou uvedeny v tabulce 1.

Obrázek 3

Rostlinné CAM mohou zasahovat do více kroků v patogenezi autoimunitní artritidy. Experimentální artritidu lze vyvolat u citlivých kmenů hlodavců subkutánní (s.c.), intradermální (i.d.) nebo intraartikulární injekcí artritogenu (např. Mtb, kolagenu typu II, buněčné stěny streptokoků atd.). Antigeny, které jsou injikovány s.c. nebo i.d., směřují do drenážních lymfatických uzlin, kde jsou iniciovány imunitní odpovědi zahrnující antigen prezentující buňky, T-buňky a B-buňky. Aktivované lymfocyty a další leukocyty pak migrují do kloubů a iniciují artritický zánět prostřednictvím různých rozpustných mediátorů, včetně prozánětlivých cytokinů a protilátek (obrázek 1). Bylinné CAM mohou inhibovat iniciaci a progresi zánětlivé artritidy ovlivněním více drah zapojených do procesu onemocnění. Konkrétní byliny, které zasahují do jednotlivých imunitních drah, jsou popsány v tabulce 1.

Výše uvedené imunologické děje v patogenezi artritidy nabízejí také mnoho slibných cílů pro terapeutický zásah (obrázky 2 a 3). Doporučujeme, aby se při hodnocení mechanismů účinku rostlinných CAM produktů vedle různých biochemických a farmakologických parametrů zvážilo testování těchto a dalších vlastních imunitních parametrů. Rostlinné CAM uvedené v tabulce 1 jsou reprezentativní z těch, které byly testovány na modulaci imunologických dějů, které přispívají k jejich antiartritické aktivitě in vivo v experimentálních modelech artritidy. Pochopitelně existuje několik dalších přírodních produktů, které mají antiartritickou aktivitu, ale jejich účinky na imunitní systém dosud nebyly testovány. Vzhledem k rozsahu tohoto článku o imunitní modulaci jsme většinu těchto produktů z tabulky 1 vyloučili.

2. Revmatoidní artritida

RA je rozšířená (0,8 %) po celém světě a postihuje všechny rasy . Ženy jsou postiženy přibližně třikrát častěji než muži. Věk nástupu onemocnění se pohybuje mezi dvacátým a padesátým rokem života, ale žádný věk není vůči tomuto onemocnění imunní. U dětí a mladých dospělých se onemocnění projevuje jako juvenilní chronická artritida (JCA). RA je chronické multisystémové onemocnění charakterizované přetrvávající zánětlivou synovitidou obvykle postihující periferní klouby v symetrické distribuci . Nekontrolovaný synoviální zánět může vést k poškození chrupavky, kostním erozím a ankylóze postižených kloubů . Studie na dvojčatech a rodinné studie ukazují, že existuje genetická predispozice k RA , a přibližně 70 % pacientů má alely HLA-DR4 nebo -DR1 nebo obě. Přesný cílový autoantigen pro RA nebyl dosud identifikován. Mezi antigeny, které se podílejí na patogenezi RA, patří kolagen typu II (CII), agrekan, imunoglobulinový vazebný protein (BiP) a heat-shock protein 65 (Hsp65) . Jak bylo uvedeno výše, NSA jsou základem léčby velké části pacientů s RA. Avšak vzhledem k nežádoucím účinkům, vysokým nákladům a omezené účinnosti těchto léků u mnoha pacientů , je v USA a dalších vyspělých zemích stále populárnější používání CAM u pacientů s RA .

3. Adjuvantní artritida: Experimentální model RA

AA lze vyvolat u potkana Lewise (RT.1) imunizací tepelně usmrceným Mycobacterium tuberculosis (Mtb) (H37Ra) . Onemocnění se projevuje zánětem tlapek včetně tlapkových kloubů. Zánět tlapek postihuje především kotníky, zápěstí a menší klouby. Artritický zánět začíná po 8-10 dnech, vrcholí mezi 15.-17. dnem a v následujících 12-15 dnech dochází ke spontánnímu, postupnému zotavení (obrázek 1). Primární imunitní reakcí v tlapkových kloubech je infiltrace synoviální tkáně mononukleárními buňkami, která, pokud není kontrolována, může vést k poškození chrupavky a kosti . V patogenezi AA se uvádí mykobakteriální hsp65 (Bhsp65). Po injekci Mtb je Bhsp65 vychytáván regionálními drenážními lymfatickými uzlinami, kde antigen prezentující buňky (APC) zpracovávají a prezentují tento antigen naivním T-lymfocytům (obrázek 3). T-lymfocyty nesoucí receptory specifické pro epitopy v Bhsp65 se pak aktivují a podléhají proliferaci. Tyto antigenem stimulované T-lymfocyty pak opouštějí lymfatické uzliny a dostávají se do periferního oběhu. Tyto T-lymfocyty pak migrují z cév do cílového orgánu, kloubu, kde iniciují imunitní patologii (obrázek 3). AA u potkanů má několik společných rysů s lidskou RA, a slouží tak jako vynikající model RA .

Model AA byl hojně využíván pro studie týkající se patogeneze autoimunitní artritidy i pro testování nových přírodních nebo syntetických antiartritických terapeutických přípravků. Bylo prokázáno, že řada rostlinných CAM produktů zmírňuje závažnost onemocnění na krysím AA modelu (tabulka 1). Tyto byliny modulují různé imunologické efektorové a regulační dráhy (podrobně popsané níže), které se podílejí na procesu onemocnění (obr. 2 a 3). Další model chronického zánětu vedoucího k úbytku kostní hmoty byl rovněž použit ke zkoumání úlohy přírodních produktů (např. zeleného čaje) při omezování poškození a úbytku kostní hmoty, který doprovází chronickou artritidu .

4. Heat-Shock Proteins (Hsps) Serve as the Target Antigens in Autoimmune Arthritis

Hsps byly spojeny s mnoha autoimunitními chorobami, jako je RA, Crohnova choroba, RS a systémový lupus erythematodes (SLE) . Hsps mohou také vyvolávat ochranu proti artritidě . Většina hsps jsou akutní stresové reaktanty, které zajišťují přežití buněk v nepříznivých podmínkách. Jsou to také molekulární chaperony podílející se na skládání proteinů a dalších funkcích pro udržení strukturální integrity jiných proteinů . Bylo zjištěno, že klon T-buněk, který byl artritogenní pro potkana Lewise, je specifický pro epitop 180-188 (p180-188) Bhsp65 . U pacientů s juvenilní chronickou artritidou (JCA) byla zjištěna reaktivita T-buněk na p180-188 Bhsp65, stejně jako na částečně homologní determinant v proteinu spojujícím kloubní chrupavku . T-lymfocyty těchto pacientů rovněž vykazovaly významnou odpověď na lidský hsp60 a Bhsp65 , což zdůrazňuje význam Hsp65 jako jednoho z hlavních antigenů v patogenezi artritidy. Další hsps, včetně hsp70 a hsp47, byly rovněž uváděny v patogenezi AA . Podobnosti v imunitní odpovědi na antigeny související s onemocněním u modelů hlodavců a lidí poskytly užitečné poznatky o patogenezi onemocnění.

Ukázalo se, že přírodní rostlinné produkty, jako jsou flavonoidy a celastrol, mohou měnit buněčnou expresi hsps . Tato pozorování jsou potenciálně významná vzhledem k pozorovaným ochranným účinkům flavonoidů zeleného čaje a ethanolového extraktu celastrolu na onemocnění . Přesná mechanistická souvislost mezi oběma skupinami pozorování však ještě není plně definována. Pokud jde o modulaci antigenně specifické odpovědi T-buněk na hsps pomocí CAM modalit, ukázali jsme, že podávání čínské bylinné formule Huo Luo Xiao Ling (HLXL) dan Lewisovým potkanům významně snížilo proliferační odpověď T-buněk na Bhsp65 , a tento účinek byl spojen s potlačením artritidy. Naopak krmení potkanů extraktem ze zeleného čaje nebo Celastrusem nedokázalo ovlivnit proliferační odpověď T-buněk na Bhsp65, a to i přes významné snížení závažnosti AA. Jak je však popsáno níže, tyto krysy vykazovaly významné změny v cytokinové odpovědi na Bhsp65, ale beze změny v proliferaci T-buněk, což odhaluje dichotomii obou imunitních parametrů. Na podporu našich výsledků bylo zjištěno, že několik dalších přírodních produktů (např. kvercetin, resveratrol, kaempferol, vineatrol) rovněž ovlivňuje proliferační odpověď lymfocytů, přičemž většina z nich vede k inhibici proliferační odpovědi . Uvádí se také disociace mezi proliferací a funkcí lymfocytů vystavených přírodním produktům, jako je kaemferol .

5 . CD4+CD25+ T-regulační buňky (Treg) jsou životně důležité pro autotoleranci a regulaci autoimunity

Bylo popsáno mnoho typů regulačních T-buněk, včetně Th2, Th3, Treg, NKT buněk a Tr1 . Nejnovějším přírůstkem do skupiny regulačních T buněk jsou CD4+CD25+ T-regulační buňky (Treg) . Treg se ukázaly jako ústřední regulátory autoimunity v různých experimentálních modelech lidských autoimunitních onemocnění . Důležité je, že na zvířecích modelech může terapie CD4+CD25+ T-lymfocyty prostřednictvím adoptivního přenosu buněk účinně oddálit a potlačit řadu imunologických onemocnění včetně diabetu, kolitidy a gastritidy . Naopak deplece Treg in vivo vede k časné iniciaci a/nebo zhoršení autoimunitní artritidy i dalších autoimunitních onemocnění.

Existují dva odlišné typy Treg: „přirozené Treg“, které se vyvinuly v thymu, a „adaptivní (indukované) Treg“, které se vyvinuly na periferii v reakci na expozici antigenu . Mechanismus účinku Treg zahrnuje buněčný kontakt mezi Treg a buňkami odpovědi a vyžaduje aktivaci Treg prostřednictvím T-buněčného receptoru (TCR) . Předpokládá se, že vylučované TGF-β a IL-10 zprostředkovávají supresi Treg in vivo.

Existují důkazy o vzájemné kontrole diferenciace T helperů 17 (Th17) a Treg. Diferenciace prozánětlivých a patogenních buněk Th17 je indukována současnou přítomností TGF-β a IL-6, zatímco přítomnost samotného TGF-β indukuje tvorbu Treg exprimujících transkripční faktor Foxp3 .

V posledních 5-10 letech si stále více uvědomujeme význam stanovení frekvence a supresivní funkce Treg pro hodnocení procesu autoimunitního onemocnění i pro hodnocení účinnosti terapeutických přípravků pro různá autoimunitní onemocnění . Defekty Treg byly zaznamenány u RA , přičemž tuto sníženou aktivitu Treg lze obnovit po úspěšné terapii, například pomocí anti-TNF-α v případě RA . Nedávná studie v oblasti transplantačního výzkumu ukázala, že dendritické buňky ošetřené triptolidem (získaným z čínské byliny Tripterygium wilfordii) podporují expanzi Treg in vitro . Doufáme, že hodnocení počtu a funkce Treg bude pravidelně začleňováno do studií zaměřených na definování mechanismů účinku různých CAM modalit, včetně přírodních rostlinných produktů. Jak bylo popsáno výše, kromě Treg existují i různé další typy regulačních T buněk . Je pravděpodobné, že různé modality CAM mohou mít rozdílný účinek na různé podskupiny regulačních T buněk, takže jeden produkt může mít výraznější účinek na Treg, zatímco druhý může mít naopak hlavní účinek na regulační buňky typu Th2 nebo Tr1.

6 . Protilátky přispívají k patogenezi autoimunitní artritidy

Studie na spontánním modelu autoimunitní artritidy zdůraznily význam protilátek při zprostředkování imunitní patologie u tohoto onemocnění; patologie je iniciována T buňkami, ale následně udržována protilátkami . Studie na modelu CIA u myší jasně prokázaly význam protilátek proti kolagenu typu II (CII) v procesu onemocnění . V současné době však není k dispozici mnoho informací o fyziologické roli protilátek proti hsp65 u AA. Patogenní účinek protilátek proti hsp65 u AA nebyl formálně vyloučen. Naopak existují důkazy z prací jiných badatelů i od nás, které poukazují na ochranný účinek protilátek anti-Bhsp65 proti AA. V jedné studii byl ochranný účinek protilátek anti-Bhsp65 proti AA přisuzován produkci IL-10 z mononukleárních buněk .

Na modelu CIA bylo prokázáno, že výtažky ze zeleného čaje granátového jablka , a Taxolu potlačují artritidu a tento účinek byl spojen s významným poklesem protilátek anti-CII. Podobný účinek na klinické onemocnění, prozánětlivé cytokiny a sérové IgG2a byl zaznamenán v jiné studii na CIA po léčbě kurkuminem, hlavní složkou kurkumy . Bylo také prokázáno, že extrakt z kurkumy vyvolává ochranu proti artritidě u modelu RA vyvolaného streptokokovou buněčnou stěnou . V jedné z našich studií založených na modelu AA jsme pozorovali, že podávání polyfenolického extraktu zeleného čaje potkanům Lewis vedlo k významnému snížení protilátkové odpovědi na Bhsp65 . Podobných výsledků bylo dosaženo s tradičním čínským lékem HLXL, který je směsí 11 různých bylin . V obou případech bylo snížení protilátkové odpovědi spojeno s odpovídajícím snížením závažnosti artritidy. Ne všechny námi testované antiartritické byliny však způsobily snížení protilátkové odpovědi na Bhsp65. V jiné studii jsme pozorovali opak, protože podávání Celastrusu Lewisovým potkanům vedlo ke zvýšení protilátkové odpovědi proti Bhsp65 navzdory výraznému potlačení klinické artritidy .

V současné době nemáme další informace, které by objasnily rozdíly ve funkčních vlastnostech podskupin protilátek, které se převážně mění po podávání různých rostlinných produktů. Navrhujeme však, že protilátky anti-Bhsp65 produkované v průběhu AA u potkanů Lewis patří do dvou hlavních kategorií, patogenní a ochranné . V této souvislosti předpokládáme, že různé byliny cílí na odlišné podskupiny protilátek, takže snížení klinické artritidy může zahrnovat buď potlačení patogenních protilátek, nebo zvýšení ochranných protilátek, nebo obojí. Kromě toho by studie vzorců protilátek pomocí panelu antigenů cílených u artritidy a dalších autoimunitních onemocnění mohly poskytnout užitečné údaje o účinku produktů CAM na proces onemocnění.

7. Regulace autoimunity prostřednictvím rovnováhy cytokinů typu T-Helper (Th1)-/Th2

Prozánětlivé cytokiny TNF-α, IL-1β a IL-6 produkované makrofágy a dalšími imunitními buňkami mají zásadní význam při vzniku a šíření artritidy . Z buněk T vylučují buňky Th1 IFN-γ a TNF-α, zatímco kontraregulační buňky Th2 vylučují IL-4, IL-5, IL-10 a IL-13 . Buňky Th1 se podílejí především na patogenezi některých orgánově specifických autoimunitních onemocnění, zatímco buňky Th2 hrají hlavní roli v systémové autoimunitě. Úloha rovnováhy Th1-Th2 v regulaci autoimunity byla potvrzena několika studiemi na zvířecích modelech. Vnímavost nebo odolnost vůči onemocnění a ochrana před onemocněním , jakož i zlepšení onemocnění u pacientů s RA byly spojeny se změnou cytokinové rovnováhy na typ Th2. Ke změně rovnováhy Th1/Th2 mohlo dojít buď snížením prozánětlivého cytokinu (např. IFN-γ), nebo zvýšením protizánětlivého cytokinu (např. IL-4/IL-10), nebo obojím .

Ve studii na CIA bylo prokázáno, že aktivace Th2 odpovědi inhibuje produkci IFN-γ i snížení závažnosti artritidy . Jiní badatelé zaznamenali downmodulaci CIA spojenou s potlačením prozánětlivých cytokinů (např. TNF-α, IL-1β a IL-6) při léčbě myší výtažky ze zeleného čaje , granátového jablka nebo Plectranthus amboinicus . Podobný účinek byl pozorován in vitro u kůry mučenky . Ve 3 samostatných studiích u AA s použitím různých přírodních rostlinných produktů, konkrétně Celastrusu , zeleného čaje a HLXL , jsme pozorovali, že každý z těchto tří rostlinných produktů vyvolal ochranu proti AA spojenou se změněným poměrem Th1/Th2 . Posledně jmenovaný účinek byl způsoben především zvýšením IL-10, zatímco IFN-γ zůstal nezměněn. Enigmaticky bylo také pozorováno, že prozánětlivé Th1 cytokiny, jako jsou IFN-γ a TNF-α, mohou vykazovat dvojí roli jako zánětlivé a imunosupresivní cytokiny . Například u AA bylo pozorováno potlačení zánětu IFN-γ . Proto je třeba opatrně hodnotit bylinné změny vyvolané CAM v hladině některých cytokinů s dvojí funkcí.

8. Buňky T-Helper 17 (Th17) zprostředkovávají zánět a poškození tkání při artritidě

Buňky Th17 vylučují IL-17, u kterého bylo prokázáno, že se podílí na zánětlivých a autoimunitních onemocněních . Podskupina T buněk Th17 se liší od buněk Th1 a Th2 a diferenciace buněk Th17 je indukována současným působením TGF-β a IL-6 . Retinoic acid-related orphan receptor gamma-t (RORγt) je transkripční faktor nezbytný pro diferenciaci Th17 buněk. Bylo prokázáno, že IFN-γ, IL-2, IL-4 a IL-27 inhibují aktivitu buněk Th17, zatímco IL-21 a IL-23 jsou důležité pro klonální expanzi a stabilizaci (udržování) buněk Th17 . IL-17 se podílí na patogenezi autoimunitních onemocnění včetně artritidy . V synoviální tekutině pacientů s RA bylo zjištěno velké množství IL-17 . Blokáda IL-17 in vivo pomocí rozpustných receptorů IL-17 nebo neutralizační protilátky proti IL-17 může u hlodavců významně oslabit artritidu . Dále bylo zjištěno, že myši s nedostatkem IL-17 nebo receptoru IL-17 jsou odolné vůči indukci CIA .

V předchozí části jsme shrnuli výsledky našich dřívějších studií, které ukázaly, že posun poměru Th1 k Th2 vyvolaný přírodními rostlinnými produkty byl spojen se snížením závažnosti AA u potkanů Lewis . Ve dvou z těchto studií jsme testovali také odpověď na IL-17. Důležité bylo, že podávání zeleného čaje nebo HLXL potkanům vedlo k významnému snížení odpovědi IL-17. Současné změny v poměru Th1/Th2 a odpovědi IL-17 tedy vyústily v příznivou antiartritickou aktivitu zeleného čaje a HLXL.

9 . Chemokiny a adhezní molekuly řídí migraci leukocytů do cílového orgánu při artritidě

Migrace lymfocytů, makrofágů a dalších buněk z krve do kloubů je řízena definovanými interakcemi zprostředkovanými chemokiny a adhezními molekulami . Chemokiny jsou chemoatraktantní cytokiny, které řídí migraci leukocytů z lumen krevních cév do cílového místa zánětu na periferii. Expresi chemokinů a jejich receptorů ovlivňují cytokiny a další mediátory zánětu. Dysregulovaná exprese chemokinů a/nebo jejich receptorů může vést k imunitní patologii. Blokování nebo neutralizace těchto molekul prostřednictvím antagonistů nebo protilátek se zkoumá pro léčbu artritidy na experimentálních modelech a u pacientů s RA . Studium úrovně exprese různých chemokinů a adhezních molekul a blokáda těchto biomolekul vhodnými činidly tak může sloužit jako důležitý nástroj pro definování mechanismů působení CAM produktů, které mají antiartritickou aktivitu.

Bylo zjištěno, že mnoho rostlinných produktů moduluje expresi specifických chemokinů v různých tkáních , přičemž mnohé z těchto chemokinů mají význam i pro pohyb leukocytů v kloubech při artritidě. V jedné z našich studií jsme uvedli jednoduchou metodu pro studium migrace radioaktivně značených leukocytů in vivo . Prokázali jsme také jasnou souvislost mezi kinetikou migrace leukocytů klouby a náchylností k AA . Radioaktivní značku lze podle potřeby nahradit fluorescenčním barvivem pro budoucí použití těchto testů ve studiích CAM.

10. Závěrečné poznámky

Tento článek je zaměřen na buněčné a humorální imunologické efektorové mechanismy, které zprostředkovávají účinek široké škály rostlinných CAM pro léčbu experimentální autoimunitní artritidy. Přírodní produkty však mohou přispívat k potlačení zánětu a artritických procesů prostřednictvím změny specifických molekulárních mediátorů těchto drah. Například antiartritická aktivita různých sloučenin (čajové polyfenoly, kyselina boswellová, morin atd.) purifikovaných z přírodních produktů byla částečně přisuzována jejich antioxidační aktivitě a jejich působení na nukleární faktor-kB (NF-kB), cyklooxygenázu-2 (COX-2), 5-lipoxygenázu (5-LOX) a matrixové metaloproteinázy (MMP) (přehled v ). Budoucí studie rostlinných produktů by proto měly zahrnovat testovací parametry, které zahrnují patologické, imunologické, biochemické a molekulárně biologické aspekty procesu onemocnění. Pokud jde o imunologické aspekty, doufáme, že se objeví více studií CAM in vitro i in vivo týkajících se novějších cytokinů (např. osa IL-17/IL-23) a Treg. Dále studium genomiky a proteomiky CAM je zástupcem několika moderních výzkumných nástrojů, jejichž investice do výzkumu CAM v současné době probíhá. To by následně nejen zvýšilo hloubku a rozsah zkoumání výzkumu CAM, ale také poskytlo rozhraní, kde by CAM a konvenční medicína mohly najít společnou řeč pro pochopení mechanismů účinku léčebných přípravků a jejich praktické využití v konečném prospěchu pacientů. Je poměrně obtížné s jistotou předvídat přírodní produkty nebo sloučeniny, které by mohly skončit jako úspěšné léčebné prostředky pro RA. Nicméně na základě výsledků získaných na zvířecích modelech RA a vymezení četných imunologických a molekulárních cílů uvedených rostlinných produktů považujeme čajové polyfenoly, celastrol, triptolid, kurkumin, boswelové kyseliny a HLXL za slibné kandidáty pro další preklinické a klinické studie u RA.

Poděkování

Autoři děkují Hua Yu, Ying-Hua Yang a Steva Komeh-Nkrumah za užitečnou kritiku a návrhy a Siddaraju Nanjundaiahovi za pomoc s výtvarným zpracováním. Tato práce byla podpořena granty (R01AT004321, P.I.: KDM, a PO1 AT002605, P.I.: BMB) od National Center for Complementary and Alternative Medicine, National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA.

.