- Co je to ELISA?
- K čemu se test používá?
- Jak test ELISA funguje?
- Jak se na test připravit
- Co test zahrnuje?
- Výsledky a jejich význam
- Co může test ovlivnit?
Co je to ELISA?
An ELISA neboli enzymatický imunosorbentní test, je metoda používaná v laboratoři na pomoc při diagnostice celé řady onemocnění. Tento test se provádí na krvi nebo moči a používá se k měření množství určitého proteinu nebo látky v těchto tělesných tekutinách, například infekčních agens, alergenů, hormonů nebo léků.
Tento test je založen na interakci mezi složkami imunitního systému zvanými antigeny a protilátky. Protilátky jsou bílkoviny, které tělo produkuje za účelem identifikace a neutralizace cizorodých látek, s nimiž se může setkat, jako jsou viry a bakterie. Látky, proti kterým se vytvářejí protilátky, se nazývají antigeny, protože stimulují imunitní reakci.
K čemu se test používá?
ELISA se v laboratoři používá k mnoha typům testů, které mohou pomoci při diagnostice mnoha různých stavů.
Nejčastěji je požadován při podezření, že jste byli vystaveni virům, jako je HIV a hepatitida B nebo C, nebo bakteriím a parazitárním infekcím, jako je toxoplazmóza, borelióza a Helicobacter pylori. Lze také změřit hladinu protilátek, aby se zjistilo, zda jste byli očkováni proti některým nemocem, jako jsou příušnice a zarděnky.
Další použití testu ELISA zahrnuje:
- Měření hladin některých hormonů, například HCG v těhotenském testu, hormonů štítné žlázy
- Detekci alergií na prach a potraviny
- Detekci nelegálních drog, například kokainu a metamfetaminu.
- Měření protilátek, které se tvoří při autoimunitních onemocněních, jako je lupus a revmatoidní artritida.
Některé soupravy jsou k dispozici i pro použití širokou veřejností, například; domácí těhotenský test je založen na principu ELISA a zjišťuje přítomnost hormonu známého jako lidský choriový gonadotropin (hCG), který se vylučuje v moči těhotné ženy.
Jak test ELISA funguje?
Existuje několik variant testu ELISA v závislosti na tom, zda se zjišťují protilátky nebo antigeny.
Pokud se zjišťují protilátky například proti viru HIV, pak se část viru HIV naváže na pevný povrch, jako je zkumavka nebo destička. Ta bude působit jako antigen. Do zkumavky se pak přidá vaše sérum, a pokud obsahuje protilátky proti antigenu, naváže se na něj. Poté se přidá další protilátka, která rozpoznává protilátky proti HIV, a naváže se na všechny navázané protilátky. Tato druhá protilátka se spojí s chemickou látkou známou jako enzym (enzym urychluje chemickou reakci) a v posledním kroku se přidá látka, která reaguje s enzymem na protilátce a vytvoří barevný produkt. Pokud je test pozitivní, dojde k barevné reakci. Pokud protilátky proti danému antigenu nemáte, pak k reakci nedojde a barevná změna se neprojeví.
Jak se na test připravit
Není nutná žádná příprava.
Co test zahrnuje?
Tento test obvykle vyžaduje odběr krve ze žíly nebo vzorku moči.
Výsledky a jejich význam
Většina testů ELISA poskytuje buď pozitivní, nebo negativní výsledek, buď vaše tělo protilátku má, nebo nemá. Některé jiné jsou semikvantitativní a udávají hodnotu, jako je tomu v případě měření hladiny hormonů.
Co může ovlivnit výsledek testu?
Nevýhodou testu ELISA je výskyt falešně pozitivního nebo falešně negativního výsledku, proto v mnoha případech následuje konfirmační test. Například test ELISA na HIV a boreliózu může často poskytnout falešně pozitivní výsledek, proto se u všech pozitivních vzorků provádí také jiný typ testu, aby se to ověřilo. K falešně pozitivním výsledkům může dojít, pokud máte nějaké základní onemocnění, například lupus nebo revmatoidní onemocnění.
Negativní výsledek nemusí vždy znamenat, že se nejedná o infekci, protože některé protilátky se nevytvářejí bezprostředně po infekci. Protilátky proti HIV se v krvi objevují až 6 týdnů po expozici viru, proto se doporučuje, abyste v případě podezření, že jste byli vystaveni viru, test po třech měsících zopakovali.
- Branson BM. Současný stav diagnostiky infekce HIV. 2007. Clin. Infect. Diseases. 45: Supplement 4:S221-5
- Prescott LM, Harley JP a Klein DA. Mikrobiologie. Wm. C. Brown publishers. Dubuque, IA. 1996
- Staffan P, Perlmann H, Bermenn P. 2005. Encyklopedie věd o živé přírodě. Enzyme-linked immunosorbent assay. Publikováno online 27. 1. 2006
http://mrw.interscience.wiley.com.dbgw.lis.curtin.edu.au
.